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专利号: 201910966191X
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述方法为先将可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株以及可产内切β-1,3-葡聚糖酶的菌株接种至发酵培养基中进行混合发酵,获得发酵液,然后从发酵液中提取获得支化β-1,3-葡寡糖。

2.如权利要求1所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株为齐整小核菌、裂褶菌、绣球菌、灰树花和/或香菇。

3.如权利要求1或2所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述可内切β-1,3-葡聚糖酶的菌株为哈茨木霉。

4.如权利要求1-3任一所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述发酵培养基中含有麸皮、玉米粉、花生粕、大豆蛋白和/或鱼蛋白胨。

5.如权利要求1-4任一所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株在发酵培养基中的接种量为0.02~0.06DCW g/mL。

6.如权利要求1-5任一所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述可产内切β-1,3-葡聚糖酶的菌株在发酵培养基中的接种量为2.5×106~1×108CFU/mL。

7.如权利要求1-6任一所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株为齐整小核菌或裂褶菌;

当可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株为齐整小核菌时,所述方法为将可产支化β-1,3-葡聚糖的齐整小核菌划线接种于平板培养基上,于25~28℃的条件下培养3~4d,得到齐整小核菌的菌丝;挑取0.1~1g齐整小核菌的菌丝接种于种子培养基中,于28~30℃、200~220rpm的条件下培养48~72h,得到齐整小核菌的种子液;

将可产内切β-1,3-葡聚糖酶的哈茨木霉划线接种于平板培养基上,于28~30℃的条件下培养3~4d,得到哈茨木霉的孢子;刮取哈茨木霉的孢子,用生理盐水重悬成孢子液;将孢子液以2.5×106~1×108CFU/mL的接种量接种于种子培养基中,于28~30℃、200~220rpm的条件下培养16~18h,得到哈茨木霉的种子液;

将齐整小核菌的种子液按照占发酵培养基总体积3~7%的接种量接种至发酵培养基中,于28~30℃、200~220rpm的条件下培养24~72h,得到齐整小核菌的培养液;将哈茨木霉的种子液按照占发酵培养基总体积2~5%的接种量接种至发酵培养基中,于28~30℃、

200~220rpm的条件下培养16~18h,得到哈茨木霉的培养液;将齐整小核菌的培养液以及哈茨木霉的培养液按照体积比1:1~1.5的比例进行混合,并且,在混合得到的培养液中补料麸皮,于28~30℃、200~220rpm的条件下继续培养24~120h,得到发酵液;将发酵液进行提取,获得支化β-1,3-葡寡糖;

或者,当可产支化β-1,3-葡聚糖的菌株为裂褶菌时,所述方法为将可产支化β-1,3-葡聚糖的裂褶菌划线接种于平板培养基上,于28~30℃的条件下培养5~7d,得到裂褶菌的菌丝;挑取0.1~1g裂褶菌的菌丝接种于种子培养基中,于28~30℃、170~200rpm的条件下培养48~72h,得到裂褶菌的种子液;

将可产内切β-1,3-葡聚糖酶的哈茨木霉划线接种于平板培养基上,于28~30℃的条件下培养3~4d,得到哈茨木霉的孢子;刮取哈茨木霉的孢子,用生理盐水重悬成孢子液;将孢

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子液以2.5×10~1×10CFU/mL的接种量接种于种子培养基中,于28~30℃、200~220rpm的条件下培养16~18h,得到哈茨木霉的种子液;

将裂褶菌的种子液按照占发酵培养基总体积5~10%的接种量接种至发酵培养基中,于28~30℃、170~200rpm的条件下培养24~72h,得到裂褶菌的培养液;将哈茨木霉的种子液按照占发酵培养基总体积2~5%的接种量接种至发酵培养基中,于28~30℃、200~

220rpm的条件下培养16~18h,得到哈茨木霉的培养液;将裂褶菌的培养液以及哈茨木霉的培养液按照体积比1:1~1.5的比例进行混合,并且,在混合得到的培养液中补料麸皮,于28~30℃、170~200rpm的条件下继续培养72~120h,得到发酵液;将发酵液进行提取,获得支化β-1,3-葡寡糖。

8.如权利要求1-7任一所述的一种生产支化β-1,3-葡寡糖的方法,其特征在于,所述齐整小核菌的培养液以及哈茨木霉的培养液的体积比为1:1.1;或者,所述裂褶菌的培养液以及哈茨木霉的培养液的体积比为1:1。

9.权利要求1-8任一所述的方法在生产支化β-1,3-葡寡糖方面的应用。

10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述支化β-1,3-葡寡糖的聚合度不超过

20dp。