1.一种金枪鱼鱼卵卵磷脂制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)酶解:金枪鱼鱼卵匀浆液中加入蒸馏水,再加入 1.8~2.5%的胰蛋白酶酶解,灭活后离心去上清;
2)浸提:酶解后的滤饼中加入丙酮,25℃磁力搅拌 10min,抽滤,用丙酮浸提 4~6 次,至丙酮不变色;
3)二次浸提:浸提后的滤饼中加入无水乙醇,维持 25~30℃,在提供 440~460W 功率微波条件下间断微波浸提,间断微波浸提具体指按照微波10s:关闭微波 5~7min 的间断微波方式完成总时长 90~120s 的微波浸提、共计时长 50~80min 的浸提;
4)纯化:硅胶层析柱中填充 100~200 目硅胶,预设静置沉降完成后将含有卵磷脂粗品的 CHCl3‑CH3OH 混合溶液上样,以 CHCl3‑CH3OH混合液为洗脱液,CHCl3‑CH3OH混合液中CHCl3和CH3OH的比例为2:1,流速为 30~45 滴/min 对其进行洗脱,收集洗脱液并干燥即得卵磷脂纯品。
2. 根据权利要求 1 所述的方法,其特征在于:在进行步骤 3)二次浸提时,无水乙醇的添加量是滤饼体积的 10.3~14.3 倍。
3. 根据权利要求 1 所述的方法,其特征在于:在进行步骤 4)纯化时,硅胶需置于
120℃烘箱中活化过夜,放真空干燥箱中降温,冷却后置于 CHCl3浸泡 12h。
4. 根据权利要求 1~3 任一项所述的方法,其特征在于:在进行步骤 4)纯化时,需将活化后的硅胶搅拌均匀,加入层析柱内,硅胶沉降完全后打开活塞,慢慢流出 CHCl3,以胶头滴管继续滴加硅胶,当层析柱内硅胶距离上端约 6cm,停止加硅胶,静置沉降 12h;之后方可上样。