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专利号: 2019103329865
申请人: 淮阴师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种生产杆菌霉素D的方法,其特征在于,包括如下步骤:I,将枯草芽孢杆菌扩繁液接种于发酵培养基中,28 38℃发酵培养72 168h,得到发酵~ ~

液;

II,将所述发酵液离心,得到发酵上清液;

III,调节所述发酵上清液的pH值≤3,静置2 8h,离心收集沉淀、干燥,得到杆菌霉素D~

干燥粗肽固体;

所述发酵培养基的制备方法由如下步骤组成:(1)将玉米秸秆烘干后粉碎,得到玉米秸秆粉末;

(2)将所述玉米秸秆粉末、纤维素酶和无菌水混合,40 60℃酶解60 100h,得到酶解液;

~ ~

(3)将所述酶解液离心,得到酶解上清液;

(4)将所述酶解上清液、酵母提取物、L‑谷氨酸钠和KH2PO4混合,得到用于生产杆菌霉素D的发酵培养基;

步骤(4)所述酶解上清液、酵母提取物、L‑谷氨酸钠和KH2PO4的混合比例为80~120mL:1~

3g:5 15g:0.5 1.5g;

~ ~

步骤(1)所述烘干的温度为60 70℃,所述粉碎的程度为过50 80目筛;

~ ~

步骤(2)所述玉米秸秆粉末与所述纤维素酶的比例为1g:500 600U;所述玉米秸秆粉末~

酶解时的料液比为1g:16 26mL;

~

步骤(3)所述离心的转速为6000 10000r/min,离心的时间为5 15min;

~ ~

步骤(1)得到玉米秸秆粉末后,还包括第一灭菌;所述第一灭菌的灭菌温度为118 124~

℃,灭菌时间为20 40min;步骤(4)所述混合后,还包括第二灭菌;所述第二灭菌的灭菌温度~

为111 119℃,灭菌时间为15 25min。

~ ~

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤I所述枯草芽孢杆菌扩繁液的OD600为

0.8 1.0;所述接种的量为4 8%。

~ ~

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤II所述离心的转速为4000 8000r/~

min,离心的时间为10 20min。

~

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤III所述离心的转速为4000 8000r/~

min,离心的时间为5 15min。

~

5.根据权利要求1 4任一项所述的方法,其特征在于,步骤III使用2 3mol/L HCl溶液~ ~

调节pH值;步骤III所述干燥的温度为50 70℃。

~