欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13336804447 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13336804447
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2019100733838
申请人: 江西科技师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:直接采用甘草为原料进行发酵,得到单葡萄糖醛酸甘草次酸。

2.如权利要求1所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:所述的甘草为豆科、甘草属多年生草本乌拉尔甘草、胀果甘草和光果甘草的根及根茎,以及各种粉碎规格、含有甘草酸的植株组织或其干燥提取物。

3.如权利要求1所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:所述发酵方法为固态发酵。

4.如权利要求1所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:所述发酵菌种为本研究团队筛选出的植物内生真菌Chaetomium globosumDX-THS3或Microsphaeropsi sarundinis DX-SES3,其中,Chaetomium globosumDX-THS3已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为湖北省武汉市武汉大学,保藏日期为2016年1月4日,保藏号为CCTCC NO:M 2016005。Microsphaeropsi sarundinis DX-SES3已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为湖北省武汉市武汉大学,保藏时间为2014年5月3日,保藏号为CCTCCNO:M2014177。

5.如权利要求1-4任一项所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)种子培养

优选地,步骤1)所述种子培养具体是:液体种子培养基在121℃灭菌25min,将植物内生真菌菌种接种至液体种子培养基,28℃、180rpm摇床培养72h,得种子液;

2)固态培养基的配制

优选地,步骤2)所述固态培养基的配制具体是:将购得的中药材甘草清洗、烘干、粉碎,以甘草为主要原料,添加麦麸、稻壳、玉米芯、米糠中的一种或多种,并添加含碳源、氮源以及无机离子的培养液,充分搅拌混匀后,固态培养基在121℃灭菌25min,随后冷却至室温;

3)接种发酵

优选地,步骤3)所述接种发酵具体是:灭菌后,接入种子液,接菌量为培养基总重量的

1%-30%,在培养箱中静置培养,发酵过程中,培养基根据菌株特性维持在最适温度范围内,即20℃-35℃,固态发酵培养7-30d后,可得到产率较高的GAMG,且有较高的β-D-葡萄糖醛酸苷酶酶活;

4)分离纯化

优选地,步骤4)所述分离纯化具体是:步骤3)获得的发酵产物用氨性醇浸泡、提取,即得GAMG的提取液,经分离纯化、真空减压浓缩、真空或喷雾干燥后,获得高产率的GAMG的混合物或单体。

6.如权利要求5所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤1)所述液体种子培养基的制备方法为:称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮沸

20~30分钟,用八层纱布过滤,加葡萄糖20g,搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000mL,分装至三角瓶,加塞、包扎。

7.如权利要求5所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤2)所述固态培养基中,甘草添加量占比为80%以上;而且在步骤2)中还可以选择性加入的麦麸、稻壳、玉米芯、米糠中的一种或多种,以增加在固态发酵时底物、菌体与空气的接触面积;配制的固态培养基含水量为20%-60%。

8.如权利要求5所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤2)所述含碳源、氮源以及无机离子的培养液的成分为:碳源(葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖)

5~10g/L;所述氮源(硝酸铵、蛋白胨、酵母粉、酵母膏、牛肉膏和硝酸钠)1~3g/L;KH2PO4 

1.2~2.2g/L;NaCl 0.5~5g/L;硫酸镁0.1~0.5g/L;ZnSO4·7H2O 0.002~0.05g/L;

MnSO4·7H2O 0.001~0.004g/L;余量为水,初始pH 5~7。

9.如权利要求5所述的一种甘草发酵制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤4)中所述氨性醇为含0.1%-2%(v/v)氨水的10%-60%(v/v)甲醇溶液或含0.1%-2%(v/v)氨水的10%-60%(v/v)乙醇溶液。

10.采用权利要求1-9任一项方法制备得到的含单葡萄糖醛酸甘草次酸的混合甜味剂或单葡萄糖醛酸甘草次酸单体,在食品、保健品、化妆品、药品中的应用。