1.一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备原生质体：分别选取ROC22甘蔗幼苗嫩叶和GT28甘蔗幼苗嫩叶作为亲本制备原生质体，分别得到ROC22甘蔗原生质体I和GT28甘蔗原生质体I；

(2)原生质体的钝化：步骤(1)中得到的ROC22甘蔗原生质体I和GT28甘蔗原生质体I的其中一种于室温下悬浮于5-7mmol/L的IOA溶液中17-22min，另一种于室温下悬浮于45-55μg/mL的R-6G溶液中17-22min，得到ROC22甘蔗原生质体II和GT28甘蔗原生质体II，接着将ROC22甘蔗原生质体II和GT28甘蔗原生质体II分别洗涤后置于黑暗条件下进行培养至密度

5 5

为4×10-6×10个/ml，得到ROC22甘蔗原生质体III和GT28甘蔗原生质体III；

(3)原生质体融合诱导物的添加：将步骤(2)得到的ROC22甘蔗原生质体III和GT28甘蔗原生质体III中的一种用硅酸盐水溶液培养后，与另一种等体积混合得到混合原生质体，其中，用硅酸盐水溶液培养的方法：取硅浓度为0.55-0.75mg/L的硅酸盐水溶液，将ROC22甘蔗原生质体III或GT28甘蔗原生质体III置于硅酸盐水溶液中于常温下培养10-15min后取出；

(4)原生质体的融合：将步骤(3)得到的混合原生质体放入细胞融合仪装有融合液的融合小室中进行电融合，融合的参数为：交流场强为150-250V·cm-1、交流频率为450-650kHz、持续时间100-300s、直流脉冲场强为1.5-2.5kV·cm-1、脉冲宽度为30-50μs以及脉冲次数1-

3个。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于：步骤(1)所述亲本制备原生质体的方法为：分别称取ROC22甘蔗幼苗嫩叶和GT28甘蔗幼苗嫩叶各0.5-0.8g，并分别将幼苗嫩叶切成大小一致的组织片；接着分别将以上两个亲本组织片置于装有4.5-

5.5L含13％甘露醇的13％CPW溶液的容器中进行密封处理27-33min，接着分别抽去两个容器中的13％CPW溶液；接着用含9％甘露醇的9％CPW溶液清洗两个容器内的组织片2-3次；接着按重量份往两个容器中分别加入4.5-5.5mL酶液，分别封好封口膜后放到摇床里，于黑暗条件下以35-45r/min的转速酶解3-4h，得到两种亲本的酶解产物，分别将两种酶解产物分离纯化，收集沉淀物分别得到ROC22甘蔗原生质体I和GT28甘蔗原生质体I。

3.根据权利要求2所述的一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于：所述分离纯化的方法为：将两种亲本酶解产物分别依次过60-80目筛和180-200目筛，并收集两种亲本的原生质体粗溶液；接着将两种亲本的原生质体粗溶液分别以450-550r/min的速度进行第一次离心处理，离心时间为4-6min，分别收集两种沉淀物，得到第一ROC22甘蔗原生质体沉淀和第一GT28甘蔗原生质体沉淀；按重量份分别往两种亲本的原生质体沉淀物中加入3-5份的9％CPW溶液，混匀后分别进行第二次离心处理，离心时间为4-6min，离心速度为450-550r/min，分别收集两种沉淀物，得到第二ROC22甘蔗原生质体沉淀和第二GT28甘蔗原生质体沉淀；接着将第二ROC22甘蔗原生质体沉淀和第二GT28甘蔗原生质体沉淀重复第二次离心的步骤2-

3次。

4.根据权利要求1所述的一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于，步骤(2)所述洗涤的方法为：将ROC22甘蔗原生质体II和GT28甘蔗原生质体II分别离心洗涤两次，其中，每次离心速度为750-850r/min，离心时间为4-6min。

5.根据权利要求1所述的一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于：步骤(3)中所述硅酸盐水溶液选自硅酸钠水溶液。

6.根据权利要求1所述的一种甘蔗体细胞杂交的方法，其特征在于：步骤(4)中，在进行电融合前，先使混合原生质体在融合液中预平衡3-4min。