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专利号: 2018112746406
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种CHO细胞基因组内某位点稳定表达蛋白质的应用,其特征在于,所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006882077.1的第691045碱基处;

所述位点附近690980-691090范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述蛋白质为分子量小于160KDa的蛋白质。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述蛋白质为多肽、功能性蛋白质、抗体、融合蛋白质中的一种。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述靶序列为CHO细胞基因NW_

006882077.1的第691045碱基处附近第691068-691090碱基处;所述靶序列为5’-GATCTAACTTGGCTTGCCTGAGG-3’。

5.根 据权 利要 求 1 所 述的 应 用 ,其 特 征 在 于 ,所 述 靶 序 列 为 5’-TGCAACTCTCAGATCTAACTTGG-3’。

6.根 据权 利要 求 1 所 述的 应 用 ,其 特 征 在 于 ,所 述 靶 序 列 为 5’-GAGAGTTGCAGTAACGAAAGTGG-3’。

7.根 据权 利要 求 1 所 述的 应 用 ,其 特 征 在 于 ,所 述 靶 序 列 为 5’-GAGTTAACTAAAGTGACTGAAGG-3’。

8.根 据权 利要 求 1 所 述的 应 用 ,其 特 征 在 于 ,所 述 靶 序 列 为 5’-TCAAGAACAGATGCTGAAGAAGG-3’。

9.根 据权 利要 求 1 所 述的 应 用 ,其 特 征 在 于 ,所 述 靶 序 列 为 5’-GCTGAAGAAGGTAATAGCATTGG-3’。

10.一种含有所述用于表达蛋白质的重组供体载体。

11.根据权利要求10所述的重组供体载体,其特征在于,所述载体为CHO细胞表达的载体。

12.根据权利要求11所述的重组供体载体,其特征在于,所述载体的制作方法为:将蛋白质基因插入到质粒5’arm和3’arm中间的区域,使该核苷酸序列位于启动子的下游并受其调控,得到重组CHO细胞表达质粒。

13.一种用于稳定表达蛋白质的CHO重组细胞系。