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专利号: 2018110018758
申请人: 江南大学附属医院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.FXR1基因、FXR1基因的表达产物中的至少一种在如下a1-a3至少一种中的用途:a1,制备用于食管癌诊断的产品;

a2,制备用于食管癌预后评估的产品;

a3,制备用于食管癌疗效监测的产品。

2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述FXR1基因的表达产物包括FXR1 mRNA和/或FXR1蛋白。

3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述食管癌诊断包括食管癌远处转移诊断。

4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述食管癌为食管鳞癌。

5.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述用于食管癌诊断的产品为引物组,所述引物组包括基于所述FXR1基因设计的引物。

6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述引物组包括如下引物:FXR1-F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

FXR1-R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

7.根据权利要求1-6任一项所述的用途,其特征在于,所述治疗食管癌的药物为所述FXR1基因的表达抑制剂、含所述FXR1基因的表达抑制剂的载体、含所述FXR1基因的表达抑制剂的载体的重组细胞或假病毒颗粒中的至少一种。

8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述表达抑制剂包括siRNA和/或shRNA。

9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.8任一序列所示,所述shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.12任一序列所示。

10.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述载体包括核苷酸序列如SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.12任一序列所示的shRNA。

11.一种稳定敲减FXR1基因的细胞株,其特征在于,所述细胞株是以食管癌细胞为目标细胞,通过权利要求7所述的假病毒颗粒感染,获得的稳定敲减FXR1基因的食管癌细胞。

12.一种构建权利要求11所述的稳定敲减FXR1基因的细胞株的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将核苷酸序列如SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.12任一所示序列的shRNA片段连接至具有抗生素抗性的病毒载体,获得重组表达载体;

(2)利用重组表达载体和病毒包装质粒共转染包装细胞株,培养转染后细胞,收集培养基上清,浓缩后获得含有假病毒颗粒的病毒液;

(3)利用病毒液感染食管癌细胞,然后利用抗生素进行药物筛选,获得稳定敲减FXR1基因的细胞株。

13.根据权利要求12所述的构建方法,其特征在于,所述病毒载体为pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro,所述病毒包装质粒包括pSPAX2和pMD2G。