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专利号: 2018109242201
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组脂肪酶突变体,其特征在于所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列突变为下列之一:(1)第144位的亮氨酸突变为丝氨酸,且第189位异亮氨酸突变为赖氨酸;

(2)第140位亮氨酸突变为甘氨酸、第141位的丙氨酸突变为亮氨酸且第189位异亮氨酸突变为赖氨酸。

2.一种权利要求1所述重组脂肪酶突变体的编码基因。

3.一种由权利要求2所述编码基因构建的重组载体。

4.一种由权利要求3所述重组载体转化得到的重组基因工程菌。

5.一种权利要求1所述重组脂肪酶突变体在制备莫西沙星药物中间体(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯中的应用。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述的应用为:将整合有重组脂肪酶突变体编码基因的基因工程菌经发酵培养后的发酵液离心,以发酵上清或分离纯化后的酶作为催化剂,以外消旋的N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯为底物,以pH值为3.0‑10.0的100mM磷酸盐的缓冲液为反应介质构成反应体系,在25‑50℃转化反应,反应结束后,获得(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯的反应液。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述反应体系中,底物初始浓度为1‑2mol/L,所述酶的用量为0.1‑0.8g/L。