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专利号: 2018107920347
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:包括,氧化石墨烯的修饰:将吐温20与氧化石墨烯溶液混合,进行反应;混合溶液中,吐温20的浓度为0.001~0.1%,氧化石墨烯的浓度为100~350ug/ml;

赭曲霉毒素A与适配体结合:将赭曲霉毒素A溶液与荧光素标记的核酸适配体溶液混匀、孵育;

荧光检测:向赭曲霉毒素A与适配体的混合溶液中加入经过吐温20修饰的氧化石墨烯、孵育,得到待检测溶液,用荧光光谱仪检测荧光光谱。

2.如权利要求1所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述氧化石墨烯的修饰,包括,将浓度为400ug/ml的氧化石墨烯溶液超声分散30min,超声功率为300W,将体积分数为0.02%的吐温20与等体积氧化石墨烯溶液混合,使得混合溶液中吐温20的浓度为0.01%,氧化石墨烯浓度为200ug/ml。

3.如权利要求1或2所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述氧化石墨烯的修饰,其中,所述进行反应,温度为室温,反应时间为1h。

4.如权利要求1或2所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述荧光素标记的核酸适配体溶液,其中,所述荧光素,包括5-羧基荧光素。

5.如权利要求4所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述荧光素标记的核酸适配体溶液,其中,所述适配体,序列为5’-FAM-GAT CGG GTG TGG GTG GCG TAA AGG GAG CAT CGG ACA-3’。

6.如权利要求5所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述荧光素标记的核酸适配体溶液的浓度为400×10-9mol/L,所述荧光素标记的核酸适配体溶液是将所述荧光素标记的核酸适配体溶解于Tris Buffer,并经过95℃温浴5min。

7.如权利要求1、2、5或6任一所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述将赭曲霉毒素A溶液与荧光素标记的核酸适配体溶液混匀、孵育,其中,所述孵育,温度为室温,时间为30min。

8.如权利要求6所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述向赭曲霉毒素A与适配体的混合溶液中加入经过吐温20修饰的氧化石墨烯,其中,所述经过吐温20修饰的氧化石墨烯的体积占所述待检测溶液体积的10%。

9.如权利要求1、2、5、6或8任一所述的用于检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述荧光检测,激发波长为484nm,激发和发射狭缝均为5nm,检测525nm的荧光强度。