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专利号: 2018102692645
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种与猪胴体瘦肉率相关的miRNA标志物,其特征在于:所述的miRNA标志物为ssc-miR-423-5p,其序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种如权利要求1所述的miRNA标志物的检测引物,其特征在于所述检测引物为:ssc-miR-423-5p的上游引物为:5′-ggctgaggggcagagag-3′;

ssc-miR-423-5p的下游引物为:5′-gtgcagggtccgaggt-3′。

3.权利要求1所述的miRNA标志物或权利要求2所述的检测引物在遗传标记辅助育种及改善猪胴体瘦肉率中的应用。

4.权利要求1所述的miRNA标志物或权利要求2所述的检测引物在制备遗传标记辅助育种及改善猪胴体瘦肉率的试剂盒中的应用。

5.一种检测权利要求1所述的miRNA标志物的试剂盒,其特征在于含有权利要求2所述的miRNA标志物的检测引物和/或探针。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述的试剂盒含有针对权利要求1所述ssc-miR-423-5p的反转录试剂、反转录引物、特异性引物、内参引物、荧光定量PCR反应液。

7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述的针对权利要求1所述ssc-miR-423-5p的反转录引物为SEQ ID NO:2。

8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述的内参引物包括GAPDH内参基因的上游引物和下游引物,上游引物序列为SEQ ID NO:5,下游引物序列为SEQ ID NO:6。

9.权利要求5~8任一项所述的试剂盒在猪肌肉组织中ssc-miR-423-5p的定量检测中的应用。

10.一种检测权利要求1所述的miRNA标志物的方法,其特征在于包括如下步骤:

1)提取猪肌肉组织总RNA;

2)通过反转录引物在反转录酶的作用下进行ssc-miR-423-5p反转录成cDNA;

3)在荧光实时定量PCR仪上将步骤(2)获得的cDNA和内参基因进行扩增检测;

4)通过溶解曲线分析,2-ΔΔCt法进行相对定量。