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专利号: 201810208859X
申请人: 东北电力大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种拟青霉菌株,其特征在于:菌株为拟青霉菌(Paecilomyces sp.)菌株M2‑1,中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC No.15262。

2.利用权利要求1所述的拟青霉菌(Paecilomyces sp.)菌株M2‑1产生的絮凝剂絮凝回收油脂酵母的方法,其特征在于:步骤如下:(1)拟青霉菌制备微生物絮凝剂

将活化培养的斜面菌种接种于液体产絮培养基中,在30℃、150r/min 条件下震荡培养

48h,然后按10%的接种量在30℃、150r/min 条件下,于液体产絮培养基中扩大培养48h,得到含有微生物絮凝剂的发酵液;

液体产絮培养基的组分及用量为:葡萄糖20 g/L,酵母膏0.5 g/L,K2HPO4 5 g/L,KH2PO4 

2 g/L,MgSO4 0.2 g/L,NaCl 0.1 g/L,(NH4)2SO4 0.2 g/L,尿素0.5 g/L,pH=8;

(2)分离提纯微生物絮凝剂

将(1)过程得到的含有微生物絮凝剂的发酵液以12000r/min,离心10min得上清液,用

1mol/L的NaOH调整pH值为7;加入上清液体积4倍的于4℃预冷的乙醇,静沉24h;以10000r/min离心10min后收集沉淀,将沉淀溶于100mL去离子水中;以12000r/min离心10min,再次加入400mL 4℃预冷的乙醇,静沉24h,以10000r/min离心10min后收集沉淀,将收集的沉淀溶于50mL去离子水中,均匀倒入玻璃培养皿中,液体厚度0.5cm,放入‑40℃冰箱冷冻2h;然后将培养皿置于冷冻干燥机中,在‑50℃下真空干燥50h,然后把培养皿在40℃烘箱中烘干至恒重,得到微生物絮凝剂;

(3)斯达氏油脂酵母的培养

将保存在斜面上的菌株编号为 CGMCC NO:2.1560 的斯达氏油脂酵母接入到无菌的YEPD培养基中;在30℃,150 r/min条件下培养36h,得到斯达氏油脂酵母种子液,然后将种子液按6%的接种量接入2L的精炼大豆油废水中,28℃、150r/min 条件下培养48h,得到经斯达氏油脂酵母处理后的精炼大豆油废水;

YEPD培养基组分及用量:酵母提取物0.1 g/L、蛋白胨0.1 g/L、葡萄糖0.2 g/L,pH6.2;

(4)微生物絮凝剂絮凝斯达氏油脂酵母

将(2)过程制得的微生物絮凝剂溶于去离子水中,配制成10g/L的溶液;取100mL(3)过程经斯达氏油脂酵母处理后的精炼大豆油废水,装入250mL烧杯中;然后向烧杯中加入上述配制好的10g/L的微生物絮凝剂3‑7mL,并加入5mL 10g/L的氯化钙,调节pH值为9,然后用搅拌器在100r/min下搅拌2 min后静置10min,吸取液面下1cm处溶液,测定微生物絮凝剂对精炼大豆油废水中斯达氏油脂酵母的絮凝率,以及对精炼大豆油废水COD的去除率。