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专利号: 2018101584821
申请人: 浙江农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种酰基-ACP硫酯酶,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.表达如权利要求1所述一种酰基-ACP硫酯酶的NcFatB基因,其特征在于:其核苷酸如SEQ ID NO:2所示。

3.如权利要求2所述的一种NcFatB基因,其特征在于:其来自于樟科新樟属植物滇新樟。

4.一种重组载体,其特征在于:包括权利要求2所述NcFatB基因。

5.如权利要求4所述的一种重组载体,其特征在于:将NcFatB基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,得到重组载体pET-28a(+)-NcFatB;其中,NcFatB基因位于T7启动子下游,由T7启动子驱动表达。

6.一种大肠杆菌工程菌,其特征在于:将权利要求5所述重组载体转入大肠杆菌中制得。

7.一种利用大肠杆菌发酵生产游离脂肪酸的方法,其特征在于:利用权利要求6所述大肠杆菌工程菌,经IPTG诱导表达,发酵培养,即可发酵生产游离脂肪酸。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于:利用权利要求6所述大肠杆菌工程菌,经由

0.1-1mM的IPTG诱导表达,在含有0-15g/L葡萄糖的LB培养基中摇瓶发酵8-24小时,4000-

6000 rpm离心10分钟,得到上清液;在上清液中包含多种具有特定碳链长度的游离脂肪酸。