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专利号: 2018100369349
申请人: 新开源禄西(南京)生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-11-13
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于,所述UGT1A1快速扩增试剂盒由UGT1A1*6扩增组和UGT1A1*28扩增组组成,其中UGT1A1*6扩增组包括扩增如序列表SEQ ID NO:1所示UGT1A1*6片段的特异性引物,UGT1A1*28扩增组包括扩增如序列表SEQ ID NO:2所示UGT1A1*28片段的特异性引物。

2.根据权利要求1所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于,UGT1A1*6的特异性引物的基因序列如序列表SEQ ID NO:3和序列表SEQ ID NO:4所示。

3.根据权利要求1所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于,UGT1A1*28的特异性引物的基因序列如序列表SEQ ID NO:5和序列表SEQ ID NO:6所示。

4.根据权利要求1所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于,UGT1A1*6扩增组和UGT1A1*28扩增组均包括特异性引物、DNA聚合酶、dNTPs和扩增缓冲液。

5.根据权利要求1所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于:UGT1A1*6扩增组和UGT1A1*28扩增组还包括DMSO和/或牛血清蛋白。

6.根据权利要求4所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒,其特征在于:DNA聚合酶为热启动Taq酶。

7.一种采用根据权利要求1~6任一项所述的UGT1A1基因的快速扩增试剂盒的快速扩增方法,其特征在于:所述扩增方法在同一体系中扩增UGT1A1*6模板和UGT1A1*28模板,使两段DNA模板变性后在不同温度下退火,其中UGT1A1*6模板先退火,退火完成后UGT1A1*28模板再退火,退火完成后在同一温度下同时延伸。

8.根据权利要求7所述的UGT1A1基因的快速扩增方法,其特征在于,扩增条件具体为:初始变性94℃保持5min,变性94℃30s,65℃退火2min,再降温至53℃,退火2min,72℃延伸

1min,30个循环。

9.根据权利要求7所述的UGT1A1基因的快速扩增方法,其特征在于:本扩增方法中的扩增体系具体为25μL体系,其中包括:模板DNA 150ng;

1×PCR buffer;

Cheetah Taq热启动酶1U;

dNTPs各200μM;

正向和反向引物各0.4μmol。

10.一种UGT1A1基因的特异性引物在快速扩增试剂盒中的应用,其特征在于:所述扩增试剂盒用于同时扩增UGT1A1基因的UGT1A1*6基因和UGT1A1*28基因。