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专利号: 201711019250X
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于鉴定毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)的特异性PCR引物,其特征在于,所述特异性PCR引物包括如SEQ ID No:1所示的引物1,以及如SEQ ID No:2所示的引物2。

2.一种利用特异性PCR引物鉴定毛冠鹿的方法,其特征在于,所述方法包括:(1)提取待测样品的总DNA;

(2)采用特异性PCR引物对所述总DNA进行PCR扩增;

(3)取步骤(2)中得到的产物做琼脂糖凝胶电泳检测;

其中,所述特异性PCR引物为权利要求1中所述的特异性PCR引物;

其中,在步骤(3)所得的琼脂糖凝胶电泳图中,若含有步骤(2)得到的产物的泳道中出现1条条带,则判断所述待测样品为来自毛冠鹿的样品,若含有步骤(2)得到的产物的泳道中不出现1条条带,则判断所述待测样品不是来自毛冠鹿的样品。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,出现的1条条带中所含有的DNA片段的长度为

240bp。

4.根据权利要求2或3所述的方法,其中,在PCR扩增过程中,以30μL的PCR扩增体系为基准,所述引物的浓度为0.25-0.5pmol/L。

5.根据权利要求4所述的方法,其中,步骤(2)中PCR扩增用总DNA的用量为45-55ng。

6.根据权利要求2或3所述的方法,其中,PCR扩增过程包括28-33个循环,单个循环包括变性、退火和延伸的步骤。

7.根据权利要求6所述的方法,其中,退火温度为55-65℃,退火时间为25-40s。

8.根据权利要求6所述的方法,其中,变性温度为93-95℃。

9.根据权利要求6所述的方法,其中,延伸温度为70-73℃。

10.根据权利要求1所述的特异性PCR引物或权利要求2-9中任一项所述的方法在鉴定毛冠鹿中的应用。