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专利号: 2017108431146
申请人: 浙江海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-28
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用复配菌剂制备絮凝剂的方法,所述复配菌剂为海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11与海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2,包括以下步骤:(1)将海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11与海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2的菌种分别接种到固体培养基上培养,加入无菌水制成GHF11菌种液与GHF2菌种液;

(2)混合两种菌种液得到混合菌液,然后接种到液体培养基中发酵培养制成发酵菌液;

(3)向发酵菌液中加入絮凝载体并继续发酵培养得到原料液;

(4)向原料液中加入乙醇静置沉降,然后离心分离沉降物,经干燥后制成絮凝剂;

所述海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11的保藏编号为CGMCC No.:14510;所述海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2的保藏编号为CGMCC No.:14509;

步骤(2)中GHF11菌种液与GHF2菌种液混合的体积比为0.5~2:1,混合菌液的接种浓度为1.5~2.5mL混合菌液/100mL液体培养基,发酵培养温度23~27℃、时间3~5天;

步骤(3)中絮凝载体的加入量为8~15g/100mL发酵菌液,继续培养1~2天;

所述的液体培养基经以下过程制成:

a.将贝类海鲜产品用水清洗干净,按质量比贝类海鲜产品:水=1:2~4加水在120~

122℃高压蒸煮100~120分钟得到蒸煮肉汤;

b.蒸煮肉汤降温至50~60℃,加入枯草杆菌蛋白酶、菠萝蛋白酶酶解8~12小时,两种蛋白酶添加后的质量浓度为4‰~8‰,然后经400~500目筛网过滤得到酶解液;

c.在95~100℃下持续加热酶解液使体积浓缩30%~50%得到浓缩液;

d.向100mL浓缩液中加入磷酸氢二钾0.8~1.4g、葡萄糖25~45g溶解均匀,然后加入陈化海水定容到1L,经高压灭菌制成液体培养基;

固体培养基为向1L液体培养基中加入15~20g的琼脂凝固制成的斜面培养基;

步骤(1)中海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11培养温度25~30℃,海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2培养温度18~23℃,培养时间36~48小时,无菌水与固体培养基的体积比1.0~1.5:1。

2.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备絮凝剂的方法,其特征在于,贝类海鲜产品包括蛤仔、蛏子、蚬子、海虹、扇贝与贻贝中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备絮凝剂的方法,其特征在于,步骤(2)中摇床转速100~160r/min。

4.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备絮凝剂的方法,其特征在于,所述絮凝载体为沙土、泥沙、海沙、硅藻土、活性炭、贝壳粉、生物炭、壳聚糖和膨润土中的一种或几种,所述絮凝载体经200~300目筛网过筛后灭菌使用。

5.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备絮凝剂的方法,其特征在于,步骤(4)中乙醇与原料液的体积比为2~4:1,在1~5℃静置6~10小时,离心速率3000~5000r/min,干燥温度为90~105℃,干燥时间1~2小时。