欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13336804447 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13336804447
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2017106301646
申请人: 李华政
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-19
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种促进罗汉果UGT72B21基因表达的方法,其特征在于,包括如下步骤:在罗汉果组培过程中和罗汉果栽培过程中,施加浓度50‑400 μmol/L的茉莉酸甲酯,以促进罗汉果UGT72B21基因的表达;

所述罗汉果组培过程中,将所述茉莉酸甲酯添加到所述罗汉果组培过程中的固体培养基中,所述罗汉果组培过程中所述固体培养基由MS、1.5mg/L 6‑BA、0.3mg/L IBA、3.5g/L琼脂、30g/l蔗糖和1.0g/L活性炭组成,所述罗汉果组培过程中的培养条件为:于相对湿度60‑

66%,光照强度1400lux,光照时间8h/d和温度21 25℃条件下培养30d;

~

所述罗汉果栽培过程中,于罗汉果授粉后20 30天后,向罗汉果表面喷洒所述浓度50‑~

400μmol/L的茉莉酸甲酯至其表面滴水为止,每天于早上、中午和晚上各喷洒一次,连续喷施5天,所述罗汉果栽培过程中,向罗汉果表面喷洒的茉莉酸甲酯的温度为4 10℃,同时,还~

采用注射的方式将茉莉酸甲酯注射入罗汉果植株的主茎中,注射量为5 16ml,注射的速率~

为4 8ml/h;

~

还包括如下步骤:qRT‑PCR检测UGT72B21基因的表达:

1)采集罗汉果果实,切成2‑4mm小块并分别用锡箔纸包好,立即置于液氮中速冻,保存于‑80℃备用;

2)采用Trizol法提取罗汉果果实总RNA;

3)将RNA反转录为cDNA;

4)采用ABI7500实时荧光定量PCR仪检测UGT72B21基因的表达量,其中,扩增UGT72B21的引物序列为:上游引物CGCCATATGCACCACCACCACCACCACATGGAAGCTACGCAGAGAGACG,下游引物CCCTCGAGTTAAGACTCAAGAAATGCAAACTTA,内参基因用UBQ5基因,扩增引物序列为:上游引物ATAAAAGACCCAGCACCACATTC,下游引物CCCTTGCCGACTACAACATCC。

2.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT72B21基因表达的方法,其特征在于,还包括:茉莉酸母液配制:用2%(v/v)的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯,配制成10000μmol/L的母液,并用

0.22μm的微孔滤膜灭菌,得到灭菌后的茉莉酸甲酯母液;

将该茉莉酸甲酯母液添加到罗汉果组培过程中的固体培养基中,至茉莉酸甲酯的终浓度为50‑400 μmol/L;

用乙醇助溶,将茉莉酸甲酯母液配成50‑400 μmol/L的溶液,施加于所述罗汉果栽培过程中。