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专利号: 2017104122463
申请人: 浙江国际海运职业技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-11-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种竹节虾抗氧化肽,其特征在于,所述竹节虾抗氧化肽的氨基酸序列为Gly-Asn-Gly-Leu-Pro。

2.一种如权利要求1所述的竹节虾抗氧化肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)原料预处理:将竹节虾虾头清洗干净,去除脂质成分,匀浆绞成浆液备用;

(2)超声波辅助酶解:向上述浆液加入超纯水制成溶液,料液比为1:6~14w/v,调节pH值至中性,加入中性蛋白酶,45~65℃下超声波辅助酶解20~60min,酶解结束后,沸水灭活,离心取上清液得酶解溶液;

(3)超滤处理:将上述酶解溶液经超滤分离后,得分子量大于10kDa组、分子量范围为5~10kDa组、分子量范围为3~15kDa组以及分子量小于3kDa组,冻干后分别测定各组的DPPH清除率;

(4)凝胶柱处理:在滤膜超滤分离后获得的各组中,选取DPPH清除率最高的组加超纯水配制成溶液,脱盐后,经Sephadex G-25凝胶柱分离纯化,收集各峰,冻干后测定各组的DPPH清除率;

(5)反相高效液相色谱处理:在凝胶柱分离后获得的各组中,选取DPPH清除率最高的组分加超纯水配制成溶液,经滤膜过滤后用反相高效液相进行分离纯化,收集各洗脱峰,浓缩后分别测定各组的DPPH清除率,其中DPPH清除率最高的组即为所需的竹节虾抗氧化肽。

3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,超声频率为10~30kHz。

4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中,洗脱液为超纯水,流速为1.0mL·min-1。

5.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(5)中,反相高效液相色谱的色谱条件为:采用C18色谱柱4.6×250mm5μm,A相为含0.1%三氟乙酸的乙腈,B相为含0.1%三氟乙酸的超纯水,柱温25℃,流速1.0mL·min-1,洗脱过程为:0%~100%B洗脱8min,15%~

85%B洗脱17min,30%~70%B洗脱10min,0%~100%B洗脱5min。

6.一种提高如权利要求1所述的竹节虾抗氧化肽在生物体内稳定性的方法,其特征在于包括以下步骤:将所述竹节虾抗氧化肽和鸡卵清蛋白分别配置成同浓度的溶液,并在配置的竹节虾抗氧化肽溶液中加入上述鸡卵清蛋白溶液,且鸡卵清蛋白溶液与该竹节虾抗氧化肽溶液的体积比为1:4~6。