欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2016103983545
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,所述枯草芽孢杆菌表达的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶含有以下特征之一:(1)结构亚基UreA、UreB、UreC的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示;

(2)结构亚基的氨基酸序列是在(1)中氨基酸序列的基础上经过取代、缺失或者添加一个或几个氨基酸得到的,且编码具有氨基甲酸乙酯水解酶及脲酶活性的由(1)衍生的蛋白质;

(3)具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述Fe3+依赖型食品级酸性脲酶来源于Bacillus licheniformis 9945A。

3.根据权利要求1所述的表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,其特征在

3+

于,所述枯草芽孢杆菌是将Fe 依赖型食品级酸性脲酶的基因连接到表达质粒上得到重组质粒,然后将重组质粒转化到宿主菌中得到的。

4.根据权利要求3所述的表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述表达质粒可以是以下任意一种:pTTB、pP43NMK、pSTOP1622、pHT43或者pMA5。

5.根据权利要求3所述的表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述宿主菌可以是以下任意一种:Bacillus subtilis 168、WB600或者WB800。

6.根据权利要求1所述的表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌,具体构建方法如下:

1)从地衣芽孢杆菌基因组上克隆获得Fe3+依赖型食品级酸性脲酶基因簇ureBL,目的基因通过KpnI及XhoI克隆到序列如SEQ ID NO.7所示的质粒pTTB,得到重组质粒pTTB-ureBL;

2)将构建的重组质粒pTTB-ureBL转化于Bacillus subtilis 168构建产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL),Fe3+依赖型食品级酸性脲酶在重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL)中表达受P43组成型启动子调控。

7.一种生产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的方法,其特征在于,所述方法是以权利要求1-

6任一所述的枯草芽孢杆菌作为生产菌株。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法是在利用生产菌株发酵生产酸性脲酶的过程中添加Fe3+。

9.权利要求1-6任一所述枯草芽孢杆菌在生产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶方面的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述应用是利用其生产的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶来降低或消除发酵食品中的尿素和/或氨基甲酸乙酯。