1.一种药用野生稻基因OobZIP1,其特征在于,该基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.如权利要求1所述的药用野生稻基因OobZIP1,其特征在于,通过以下步骤制得:
1)提取药用野生稻RNA;
2)合成cDNA第一链;
3)PCR扩增:以cDNA第一链为模板,采用如SEQ ID No.2所示的上游引物以及如SEQ ID No.3所示的下游引物,进行PCR扩增,获得目的基因条带,电泳切胶回收。
3.如权利要求2所述的药用野生稻基因OobZIP1,其特征在于,所述步骤3)中,采用
50μL反应体系:10×PCR Buffer for KOD-Plus-Neo 5μL;2mM dNTPs 5μL;25mM MgSO4
3μL;上游引物1.5μL,下游引物1.5μL;模板5μL;KOD-Plus-Neo1μL;ddH2O 28μL;其中所述模板为cDNA第一链;
PCR反应程序为:94℃预变性2min;循环40次;最后72℃延伸5min。
4.如权利要求1所述的药用野生稻基因OobZIP1的表达载体的构建方法,包括以下步骤:a)PCR扩增:以该基因的重组质粒为模板,采用如SEQ ID No.4的上游引物以及如SEQ ID No.5所示的下游引物,进行PCR扩增,电泳切胶回收;
b)双酶切:用Sac I和Not I对步骤a)得到的切胶回收产物进行双酶切,切胶回收后得到酶切基因片段;
c)连接:用Sac I和Not I对质粒pet32a(+)进行双酶切,切胶回收后,与步骤b)得到的酶切基因片段进行连接,得到重组原核表达载体pet32a-OobZIP1。
5.如权利要求4所述的表达载体。
6.如权利要求1所述的药用野生稻基因OobZIP1的表达载体的构建方法,所述表达载体为超表达载体,包括以下步骤:a)PCR扩增:以该基因的重组质粒为模板,以如SEQ ID No.6所示的上游引物和如SEQ ID No.7所示的下游引物,进行PCR扩增,电泳切胶回收;
b)双酶切:用Nco I和Sam I对步骤b)得到的切胶回收产物进行双酶切,切胶回收后得到酶切基因片段;
c)连接:用Nco I和Sam I对质粒pCAMBIA1301进行双酶切,切胶回收后,与步骤b)得到的酶切基因片段进行连接,得到表达载体pCAMBIA1301-OobZIP1。
7.如权利要求6所示的表达载体。
8.一种氨基酸序列,其特征在于,所述氨基酸由权利要求1所述的药用野生稻基因OobZIP1编码,所述氨基酸序列如SEQ ID No.16所示。
9.如权利要求1所述的药用野生稻基因OobZIP1在增强水稻抗逆性中的应用。
10.一种转基因植株的制备方法,其特征在于,由权利要求7所示的表述载体转化农杆菌感受态细胞,并介导入成熟愈伤组织培养得转基因植株。