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专利号: 2015105235830
申请人: 河南科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,包括纳塔尔链霉菌的发酵,其特征在于:在发酵过程中以流加的方式向发酵培养基中添加纳他霉素混合前体,在发酵过程中添加真菌诱导子,所述的纳他霉素混合前体由摩尔比为1:1 15:1 15的丙酸钠、乙~ ~酸钠和异亮氨酸构成,纳他霉素混合前体在纳塔尔链霉菌发酵培养基中的添加量为0.1~

1.0%(V/V),添加时间为发酵开始后的24h 36h,且每2h添加一次,所述的真菌诱导子为产黄~青霉的发酵液,在产黄青霉发酵培养基中于28 34℃条件下摇床培养2 7d,其中的产黄青霉~ ~发酵培养基每1000mL中含有葡萄糖20 30g,酵母膏1 5g,牛肉膏5 10g;所述真菌诱导子在~ ~ ~纳塔尔链霉菌发酵培养基中的添加量为1 10%(V/V),添加时间为发酵开始后的60h;所述纳~塔尔链霉菌在发酵培养基中的接种量为1 10%(V/V),发酵温度为26 32℃,发酵时间为5~ ~ ~

9d。

2.根据权利要求1所述的一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,其特征在于:所述的发酵培养基每1000mL中含有葡萄糖10 20g,黄豆饼粉20 40g,可溶性淀粉~ ~

20 40g,酵母膏5 10g。

~ ~

3.根据权利要求1所述的一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,其特征在于,所述的真菌诱导子由以下步骤制备而得:步骤一、真菌的培养:将斜面培养基上的产黄青霉接种于液体种子培养基中,在28 34~℃、150 220r/min条件下培养1 7d;

~ ~

所述的斜面培养基每1000mL中含有玉米淀粉50 100g,葡萄糖15 30g,琼脂粉15 20g;

~ ~ ~

所述的液体种子培养基每1000mL中含有葡萄糖20 30g,酵母膏1 5g,牛肉膏5 10g,pH ~ ~ ~为7.0 7.5;

~

步骤二、将步骤一培养好的发酵液先六层纱布过滤,取滤液,然后8000 12000r/min离~心,保留上清液,之后,用微孔滤膜过滤,即得真菌诱导子。

4.根据权利要求1所述的一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,其特征在于,发酵所采用的纳塔尔链霉菌种子由以下步骤制备:将斜面培养基上的纳塔尔链霉菌接种于液体种子培养基中,26 32℃培养2 7d;

~ ~

所述的斜面培养基每1000mL中含有葡萄糖10 20g,麦芽浸膏1 5g,酵母膏1 5g,胰蛋白~ ~ ~胨5 15g,琼脂粉15 20g;

~ ~

所述的液体种子培养基每1000mL中含有葡萄糖15 30g,蛋白胨5 15g,酵母膏5 10g,氯~ ~ ~化钠2 12g。

~

5.根据权利要求1所述的一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,其特征在于:所述发酵培养基的pH 6.5 8.0。

~

6.根据权利要求1所述的一种混合前体耦合真菌诱导子高效合成纳他霉素的方法,其特征在于:所述的纳塔尔链霉菌为纳塔尔链霉菌属中的任何菌株。