1.用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的引物对和探针,其特征在于:包括检测HIV-1病毒RNA的pol基因的第184位、151位和65位突变位点M184V、M184I、Q151M和K65R的ARMS引物对和Taqman探针;
M184V的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列,Taqman探针为SEQ ID No.10所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记
5’端和3’端;
M184I的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.2和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列,Taqman探针为SEQ ID No.10所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记
5’端和3’端;
Q151M的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.5和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列,Taqman探针为SEQ ID No.10所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记
5’端和3’端;
K65R的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示的核苷酸序列,Taqman探针为SEQ ID No.9所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记5’端和3’端。
2. 用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的引物对和探针,其特征在于:包括检测HIV-1病毒RNA的pol基因的第184位突变位点M184V、M184I的ARMS引物对和Taqman探针;
M184V的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列;
M184I的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.2和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列;
ARMS引物对的Taqman探针为SEQ ID No.10所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记5’端和3’端。
3.用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的引物对和探针,其特征在于:包括检测HIV-1病毒RNA的pol基因的第151位突变位点Q151M的ARMS引物和Taqman探针;
Q151M的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别为SEQ ID No.5和SEQ ID No.8所示的核苷酸序列,ARMS引物对的Taqman探针为SEQ ID No.10所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记5’端和3’端。
4.用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的引物对和探针,其特征在于:包括检测HIV-1病毒RNA的pol基因的第65位突变位点K65R 的ARMS引物和Taqman探针;
K65R的ARMS引物对的上游引物和下游引物分别SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示的核苷酸序列,ARMS引物对的Taqman探针为SEQ ID No.9所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记5’端和3’端。
5.用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的试剂盒,其特征在于:包括权利要求1至4任一项所述的ARMS引物对和探针。
6.根据权利要求5所述的用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的试剂盒,其特征在于:还包括RT-PCR 缓冲液、dNTPs、MgCl2、M-MLV逆转录酶、Taq DNA聚合酶。
7.根据权利要求6所述的用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的试剂盒,其特征在于:还包括模板RNA、试剂盒质控品引物对和试剂盒质控品的Taqman探针,试剂盒质控品引物对的上游序列和下游序列分别为SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示的核苷酸序列;试剂盒质控品的Taqman探针为SEQ ID No.13所示的核苷酸序列,分别用FAM和BHQ1标记5’端和3’端。
8.根据权利要求7所述的用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的试剂盒,其特征在于:各组分含量分别为:RT-PCR 缓冲液终浓度0.5×~2×;
dNTPs终浓度 0. 6~1.2mM;
ARMS引物对的上、下游引物以及试剂盒质控品引物对的上、下游引物的终浓度均为
100~600nM;
M-MLV逆转录酶终浓度0.4~2.4U/μL;
TaqDNA聚合酶终浓度 0.01~0.06U/μL;
MgCl2 终浓度为1.5~3.5mM;
ARMS引物对的Taqman探针以及试剂盒质控品引物对的Taqman探针终浓度均为100~
600nM;
模板RNA终浓度 0.01~100ng/μL。
9.根据权利要求6所述的用于检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点的试剂盒,其特征在于:RT-PCR 缓冲液终浓度1×;
dNTPs终浓度 0.8mM;
ARMS引物对的上、下游引物以及试剂盒质控品引物对的上、下游引物的终浓度均为
200nM;
M-MLV逆转录酶终浓度1.6U/μL;
TaqDNA聚合酶终浓度0.04U/μL;
MgCl2 终浓度为2mM;
ARMS引物对的Taqman以及试剂盒质控品引物对的Taqman探针终浓度均为100nM;
模板RNA终浓度 0.1~10ng/μL。
10.权利要求1至4任一项所述的ARMS引物对和探针在检测艾滋病治疗药物3TC和FTC耐药突变位点中的应用。