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专利号: 2014104581545
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2026-04-02
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种转化知母皂苷BII的方法,其特征在于使用β-葡萄糖苷酶磁性分子印迹聚合物水解知母皂苷BII为知母皂苷AⅢ,所述转化的步骤为:称取知母皂苷BII 20mg,β-葡萄糖苷酶的磁性分子印迹聚合物25mg,加入pH4.8乙酸-乙酸钠缓冲溶液20mL,于55℃反应2h;

所述β-葡萄糖苷酶磁性分子印迹聚合物的制备方法为:

i)在乙二醇中溶解FeCl3·6H2O形成黄色溶液,在上述溶液中加入乙酸钠和聚乙二醇

2000,200℃下反应,至反应完成后,用无水乙醇和去离子水分别洗涤后干燥后得Fe3O4磁性纳米粒子;

ii)将步骤i)的磁性纳米粒子加热加入油酸对Fe3O4磁性纳米粒子进行改性,反应完成后将溶液冷却至室温,用蒸馏水反复洗涤油酸包裹的Fe3O4直至pH=7,然后在200℃真空下干燥,即得黑色的油酸改性的Fe3O4磁性纳米粒子;

iii)取以DMSO为溶剂的聚乙烯-乙烯醇澄清溶液,将β-葡萄糖苷酶溶解在上述溶液中,然后加入步骤ii)制备的Fe3O4磁性纳米粒子,室温下搅拌混匀;每次取0.5mL含有酶的DMSO/EVAL溶液分散在10mL的分散剂中,所述分散剂组成为:用4mL的去离子水和6mL的异丙醇组成水-异丙醇混合液为分散剂,可得磁性分子印迹聚合物;

iv)用0.1%的SDS溶液和去离子水洗步骤iii)获得的磁性分子印迹聚合物,在pH=4.8的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中进行重吸附,然后在磁场条件下分离获得固定β-葡萄糖苷酶的磁性分子印迹聚合物。