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专利号: 201410216379X
申请人: 陕西科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1. 一种低能离子注入介导Ri 质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于,包括以下步骤:1) 将黄芩外植体转接到含50 ~200μg/mL 乙酰丁香酮的MS 固体培养基中,转接后于25 ~28℃黑暗培养2 ~3 天,培养后用无菌水将黄芩外植体表面的培养基冲洗干净,冲洗干净后将黄芩外植体表面的无菌水用无菌风吹干,吹干后在黄芩外植体上划痕;2) 经过步骤1) 后,将黄芩外植体放置于离子注入机的真空靶室内,然后对黄芩外植体进行低能离子注入;3) 将经过低能离子注入的黄芩外植体浸泡入含Ri 质粒的TE 缓冲溶液中并进行避光温育,温育的时间为2 ~4h,温育的温度为25 ~28℃,然后将黄芩外植体接种于含0.1 ~0.5mg/L 吲哚-3- 丁酸的MS 固体培养基中,接种后于25 ~28℃黑暗培养21 ~25 天诱导出毛状根。2.根据权利要求1所述一种低能离子注入介导Ri质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于:所述黄芩外植体为切成0.5 ~1.0cm 的黄芩带节茎段的碎段。3.根据权利要求1所述一种低能离子注入介导Ri质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于:所述含Ri 质粒的TE 缓冲溶液中Ri 质粒的浓度为≥200μg/mL。4. 根据权利要求1 所述一种低能离子注入介导Ri 质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于:所述离子注入的条件为:以N+ 作为注入离子,注入剂量为2.5×1016 ~3.5×1016ions/cm2,注入能量为25 ~30KeV,脉冲时间为5 ~10s,间隔时间为5 ~10s,真空度为1.5 ~2.0×10-4Pa。