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专利号: 201410057876X
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种应用棒状杆菌表达系统表达缬氨酸合成途径基因ilvBNC并发酵生产缬氨酸的方法,其特征在于,所述棒状芽孢杆菌表达系统通过质粒回补基因组alr基因缺陷,从而使表达载体在无抗生素添加情况下稳定存在于菌体中并行使表达功能;所述表达系统包括alr基因缺陷型表达宿主和核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的表达载体;所述方法主要步骤为:(1)扩增ilvBNC基因片段,在两端分别引入NotI及HpaI酶切位点;将PCR产物片段以相应限制酶酶切后连入以同样限制酶酶切的表达载体,得到重组表达质粒;

(2)将重组表达质粒转入通过alr敲除载体敲除了alr基因的棒状杆菌,发酵产缬氨酸。