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专利号: 2013105976966
申请人: 中国科学院西北高原生物研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2025-10-15
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种制备土大黄苷和丹叶大黄素的方法,包括如下步骤:

1)将粉碎至40目的胡芦巴种子按料液比为1g:10mL加入质量百分浓度为40%的乙醇水溶液进行加热回流提取3次,合并提取液,60℃浓缩至干,得固形物质量百分含量为35%的胡芦巴提取物;

2)将胡芦巴提取物用去离子水以1g:5mL溶解后,用等体积的石油醚萃取2次,合并下层清液再用等体积的乙酸乙酯萃取2次,合并下层清液再用等体积的正丁醇萃取2次,合并上层萃取液后浓缩,在50℃条件下减压浓缩,得固形物质量百分含量为15%的待分离样品;

3)将含有正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的两相溶剂系统混匀后静置分层,分别收集上相溶剂和下相溶剂,分别超声20分钟,以上相为固定相,下相为流动相,向高速逆流色谱仪的分离管中泵入所述固定相,保持分离管温度为25℃,以800rpm的转速正转10分钟后泵入流动相,待体系平衡后,泵入上样溶液,并以1.5mL/min的流速进行高速逆流色谱分离,检测波长为320nm,依次接收流出液I和流出液II,将流出液I和II干燥至恒重,得到土大黄苷和丹叶大黄素;

其中,正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为1:6:2:10;

上样溶液为将步骤3)所得待分离样品溶于流动相而得;

待分离样品与流动相的用量比为40mg:10mL;

流出液I和流出液II的出峰时间依次为70-110分钟,140-180分钟;

或者,包括如下步骤:

1)将粉碎至60目的胡芦巴种子按料液比为1g:30mL加入质量百分浓度为80%的乙醇水溶液进行加热回流提取3次,合并提取液,60℃浓缩至干,得固形物的质量百分含量为62%的胡芦巴提取物;

2)将胡芦巴提取物用去离子水以1g:15mL溶解后,用等体积的石油醚萃取10次,合并下层清液用等体积的乙酸乙酯萃取10次,合并下层清液再用等体积的正丁醇萃取10次,合并上层萃取液后,在70℃条件下减压浓缩,得固形物的质量百分含量为30%的待分离样品;

3)将含有正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的两相溶剂系统混匀后静置分层,分别收集上相溶剂和下相溶剂,分别超声10分钟,以上相为固定相,下相为流动相,向高速逆流色谱仪的分离管中泵入所述固定相,保持分离管温度为35℃,以900rpm的转速正转20分钟后泵入所述流动相,待体系平衡后,泵入上样溶液,并以2.5mL/min的流速进行高速逆流色谱分离,检测波长为320nm,依次接收流出液I和流出液II,将流出液I和II干燥至恒重,得到土大黄苷和丹叶大黄素单体;

其中,正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为3:10:6:14;

上样溶液为将步骤3)所得待分离样品溶于流动相而得;

待分离样品与流动相的用量比为160mg:10mL;

流出液I和流出液II的出峰时间依次为50-80分钟,90-120分钟;

或者,包括如下步骤:

1)将粉碎至50目的胡芦巴种子按料液比为1:20g/mL加入质量百分浓度为60%的乙醇水溶液进行加热回流提取3次,合并提取液,60℃浓缩至干,得固形物的质量百分含量为

57%的胡芦巴提取物;

2)将胡芦巴提取物用去离子水以1g:10mL溶解后,用等体积的石油醚萃取5次,合并下层清液再用等体积的乙酸乙酯萃取5次,合并下层清液再用等体积的正丁醇萃取5次,合并上层萃取液后,在60℃条件下减压浓缩,得固形物的质量百分含量为27%的待分离样品;

3)将含有正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的两相溶剂系统混匀后静置分层,分别收集上相溶剂和下相溶剂,分别超声30分钟,以上相为固定相,下相为流动相,向高速逆流色谱仪的分离管中泵入所述固定相,保持分离管温度为30℃,以850rpm的转速正转15分钟后泵入所述流动相,待体系平衡后,泵入上样溶液,并以2.2mL/min的流速进行高速逆流色谱分离,检测波长为320nm,依次接收流出液I和流出液II,将流出液I和II干燥至恒重,得到土大黄苷和丹叶大黄素;

其中,正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为2:8:4:12;

上样溶液为将步骤3)所得待分离样品溶于所述流动相而得;

待分离样品与流动相的用量比为80mg:10mL;流出液I和流出液II的出峰时间依次为

60-90分钟,110-150分钟;

或者,包括如下步骤:

1)将粉碎至50目的胡芦巴种子按料液比为1g:20mL加入质量百分浓度为80%的乙醇水溶液进行加热回流提取3次,合并提取液,60℃浓缩至干,得固形物的质量百分含量为55%胡芦巴提取物;

2)将胡芦巴提取物用去离子水以1g:10mL溶解后,用等体积的石油醚萃取7次,合并下层清液再用等体积的乙酸乙酯萃取7次,合并下层清液再用等体积的正丁醇萃取7次,合并上层萃取液后,在60℃条件下减压浓缩,得固形物的质量百分含量为27.6%的待分离样品;

3)将含有正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的两相溶剂系统混匀后静置分层,分别收集上相溶剂和下相溶剂,分别超声30分钟,以上相为固定相,下相为流动相,向高速逆流色谱仪的分离管中泵入所述固定相,保持分离管温度为30℃,以850rpm的转速正转15分钟后泵入所述流动相,待体系平衡后,分别在0分钟,145分钟,250分钟和340分钟相应的时间点依次泵入上样溶液,并以2.2mL/min的流速进行高速逆流色谱分离,检测波长为320nm,实现连续进样,循环分离,依次接收流出液I和流出液II,合并各流出液I,干燥至恒重;合并各流出液II干燥至恒重,得到土大黄苷和丹叶大黄素;

其中,正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为2:8:4:12;

上样溶液为将步骤(3)所得待分离样品溶于流动相而得;

所述待分离样品与流动相的用量比为120mg:10mL;

流出液I的出峰时间依次为60-90分钟,200-230分钟,320-350分钟,430-460分钟;

流出液II的出峰时间依次为100-130分钟,240-270分钟,350-380分钟,465-490分钟。