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专利号: 2013105407556
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.阿拉伯呋喃糖苷水解酶AXAH用于提高麦芽汁过滤性能。

2.如权利要求1所述方法,其特征在于,是在麦芽糖化过程中加入阿拉伯呋喃糖苷水解酶。

3.如权利要求2所述方法,其特征在于,所述阿拉伯呋喃糖苷水解酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.如权利要求2所述方法,其特征在于,所述阿拉伯呋喃糖苷水解酶添加量为4~

8mU/g麦芽。

5.如权利要求2所述方法,其特征在于,是在麦芽糖化初始阶段加入4~8mU/g阿拉伯呋喃糖苷水解酶。

6.如权利要求5所述方法,其特征在于,是在麦芽糖化初始阶段加入4mU/g阿拉伯呋喃糖苷水解酶。

7.如权利要求5所述方法,其特征在于,是在麦芽糖化初始阶段加入6mU/g阿拉伯呋喃糖苷水解酶。

8.如权利要求5所述方法,其特征在于,是在麦芽糖化初始阶段加入8mU/g阿拉伯呋喃糖苷水解酶。

9.如权利要求1所述方法,其特征在于,所述阿拉伯呋喃糖苷水解酶制备方法如下:

1)对大麦麦芽进行粉碎后加入醋酸-醋酸盐缓冲液,进行浸提;

2)低温离心取上清液进行20~40%饱和度的硫酸铵沉淀盐析,然后离心取沉淀用醋酸-醋酸盐缓冲液复溶,再离心取上清液得到含盐粗酶液;

3)将含盐粗酶液置于透析袋中,用醋酸-醋酸盐进行透析,得到去盐的透析液,离心去除变性蛋白得到粗酶液;

4)用蛋白纯化系统,利用阳离子交换柱、阴离子交换柱和凝胶柱纯化粗酶液,得到AXAH纯品。

10.如权利要求9所述方法,其特征在于,所述步骤4)中:采用HiPrep16/10SP FF20mL强阳离子柱,用一定pH和浓度的醋酸-醋酸盐缓冲液平衡,收集有酶活液体进行超滤浓缩并更换缓冲液为一定pH和浓度的醋酸-醋酸盐,得到部分纯化酶液;采用HiPrep16/10Q FF强阴离子柱,用一定pH和浓度的醋酸-醋酸盐缓冲液平衡,待紫外吸收和电导基线稳定后,再用含1mol/L NaCl的缓冲液进行线性洗脱,洗脱一定的柱体积,收集有酶活部分进行超滤浓缩,得到进一步部分纯化酶液;采用HiPrep16/60Sephacryl S-100HR凝胶柱,用一定pH和浓度,含0.15mol/L NaCl的醋酸-醋酸盐缓冲液洗脱,收集有酶活部分,得到AXAH纯品。