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专利号: 201310486292X
申请人: 河南工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 其他类不包含的食品或食料;及其处理
更新日期:2024-02-26
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,所述方法主要包括以下步骤:

S1配制混合反胶束体系,所述混合反胶束体系包括表面活性剂、有机溶剂、助溶剂、缓冲溶液,所述表面活性剂由阴离子表面活性剂和非离子型表面活性剂复配而成,其中,所述混合反胶束体系中表面活性剂总浓度为50-110g/L,有机溶剂与助溶剂的体积比为4:1,缓冲溶液的pH为6-9、加入后使所述混合反胶束体系中水与表面活性剂的摩尔比W0值为

16-24,阴离子表面活性剂和非离子型表面活性剂的体积配比为1:1-7∶3;

S2将大豆粉与步骤S1中制备的混合反胶束体系混合,所述大豆粉加入量为15-30g/L,混合后利用超声波辅助萃取,之后固液分离得到含有蛋白和油脂的蛋白前萃液;

S3将步骤S2中制备的蛋白前萃液旋转蒸发至有机溶剂蒸脱的65%-70%以回收部分有机溶剂得到蛋白前萃液的浓缩液;

S4将萃取用的缓冲溶液与步骤S3中制备的蛋白前萃液的浓缩液混合,反萃取得到蛋白水溶液和混合油,实施该步骤时,先用等体积的乙醇和萃取用的缓冲溶液的混合液对蛋白前萃液进行超声辅助后萃取,然后离心分离,上层为混合油下层为蛋白水溶液;

S5分别对步骤S4中制备的蛋白水溶液和混合油进行醇洗纯化,醇洗后的混合液经柱层析分离回收表面活性剂,其中,S51在蛋白液中,在搅拌的情况下,加入浓度为95%的乙醇,使两者混合后乙醇的体积分数为60%-70%,之后振荡使表面活性剂溶解在乙醇水溶液中,分离得到的浆状物冷冻干燥后得到蛋白产品;

S52在混合油中,加入体积分数为60%-70%的乙醇水溶液,振荡后使表面活性剂溶解在乙醇水溶液中,静置分离,上层混合油在85℃-90℃水浴中旋转蒸发,蒸脱有机溶剂后即得到油脂;

S53分别收集步骤S51、S52中分离后的乙醇水溶液,使之通过装有110℃活化4-5小时的氧化铝的柱子,在柱子下面接收到乙醇与表面活性剂的混合液,经过旋转蒸发得到乙醇和非离子型表面活性剂,用40-50摄氏度的浓度为95%的乙醇洗脱柱子,在柱子下面接收到乙醇与表面活性剂的混合液,经过旋转蒸发得到乙醇和离子型表面活性剂。

2.根据权利要求1所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S1中制备的混合反胶束体系中,阴离子表面活性剂可以是丁二酸二异辛酯磺酸钠(AOT)、十二烷基硫酸钠(SDS)中的一种,非离子表面活性剂为Tween系列,如Tween60(聚氧乙烯失水山梨醇硬脂酸酯)中的一种。

3.根据权利要求2所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S1中制备的混合反胶束体系中,形成反胶束的有机溶剂为异辛烷、环己烷、正庚烷中的任意一种,助溶剂为正辛醇;形成反胶束的缓冲溶液为KCl-磷酸盐或者NaCl-磷酸盐;

其中缓冲溶液的pH为6-9、加入量为30-50ml/L,使反胶束体系中水与表面活性剂的摩尔比W0值为16-24。

4.根据权利要求3所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S2中超声波功率为210-240W,萃取温度为35℃-45℃,萃取时间为40-60min,所述的固液分离为离心分离,转速为3000-6000r/min,离心时间为10-15min。

5.根据权利要求4所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S3中所述有机溶剂的回收工艺为,旋转蒸发的条件为转速为40-50r/min,温度

45-50℃,真空度<80kpa,旋转蒸发至溶剂蒸脱的65%-70%。

6.根据权利要求5所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S4中所述的萃取用的缓冲溶液与步骤S3中制备的蛋白前萃液的浓缩液混合反萃取得到蛋白水溶液和混合油的工艺为,先用等体积的浓度为15%-20%(V/V)的乙醇和缓冲溶液对前萃液进行超声辅助后萃取,然后离心分离,上层为混合油下层为蛋白水溶液。

7.根据权利6所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,

其特征在于,所述的后萃取蛋白过程为,萃取用的缓冲溶液和乙醇的混合液中乙醇的浓度为(V/V)10%-15%,缓冲溶液为pH为7-9的KCl浓度为1.0-1.3mol/L的磷酸盐缓冲液;超声辅助萃取条件为超声波的频率为20-50KHz,功率为180W-210W,萃取温度为

35℃-40℃,萃取时间为30min-40min。

8.根据权利要求1所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S5中所述的对蛋白水溶液和混合油进行醇洗纯化,并回收表面活性剂的工艺为,在蛋白液中,在搅拌的情况下,加入浓度为95%的乙醇,使两者混合后乙醇的体积分数为

60%-70%,在振荡器上振荡20-30min,离心分离,转速为3000-4000r/min,离心时间为

8-10min。浆状物冷冻干燥,即得到蛋白产品。

9.根据权利要求1所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S5中所述的对蛋白水溶液和混合油进行醇洗纯化,并回收表面活性剂的工艺为,在混合油中,加入体积分数为60%-70%的乙醇水溶液,在振荡器上振荡20-30min,使表面活性剂溶解在乙醇水溶液中,静置1h分离,上层混合油在85℃-90℃水浴中旋转蒸发,蒸脱溶剂后即得到油脂。

10.根据权利要求1所述的萃取大豆蛋白并提纯和回收表面活性剂的方法,其特征在于,步骤S5中所述表面活性剂的回收工艺为,收集步骤S51、S52中分离后的乙醇水溶液,通过装有110℃活化4-5小时的氧化铝的柱子,在柱子下面接收到乙醇表面活性剂混合液,经过旋转蒸发得到乙醇和非离子型表面活性剂,用40-50摄氏度的浓度为95%的乙醇洗脱柱子,在柱子下面接收到乙醇表面活性剂混合液,经过旋转蒸发得到乙醇和离子型表面活性剂。