1.一种薇甘菊萎蔫病毒，其特征在于命名为蚕豆病毒属（Fabavirus）薇甘菊萎蔫病毒MMWV-5（Mikania micrantha wilt virus，MMWV-5），保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国武汉武汉大学，保藏号为CCTCC NO：V201321，保藏时间为2013年7月

10日。

2.权利要求1所述的薇甘菊萎蔫病毒的繁殖，其特征在于包括以下步骤：（1）将薇甘菊萎蔫病毒毒原，利用pH7.0的0.01mol/L磷酸缓冲液稀释后，在25-27℃，常规汁液摩擦接种，当蚕豆幼苗具有3～4片真叶时，在顶部的第1片和第2片真叶上均匀地洒一层石英砂，用齐头毛笔蘸取接种液在接种叶上轻轻摩擦，随后用蒸馏水冲洗掉叶片上残留的物质；薇甘菊萎蔫病毒在蚕豆上繁殖，7-10d周采取病叶；

（2）按病叶重量加入2倍体积预冷的内含体积分数为0.1％巯基乙醇，质量分数为

0.01％Triton X-100，质量分数为2.5%蔗糖的pH7.5的0.5mol/L的磷酸钾盐缓冲液，匀浆

2min，4℃静置1h，8000g离心20min；

（3）取上清液，加入PEG-6000、NaCl和Triton X-100，使其浓度分别达到质量分数为

6%、0.1mol/L、质量分数为2.5%，4℃下搅拌6h，8500g离心5min；

（4）取沉淀，用内含质量分数为0.01％Triton X-100的pH7.5的0.01mol/LKPB，充分悬浮，7000g离心10min；

（5）吸取上清液置于离心管，沉淀再悬浮离心，重复2次，合并上清液；

（6）上清液78000g超速离心2h；

（7）沉淀用pH7.5的0.01mol/L KPB悬浮，悬浮液低速离心后取上清液，得到提纯病毒液。

3.一种利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒包含权利要求1所述的薇甘菊萎蔫病毒。

4.根据权利要求3所述的利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒，其特征在于：由以下组分组成：

1）权利要求1所述的薇甘菊萎蔫病毒；

2）内含体积分数为0.1％巯基乙醇，质量分数为0.01％Triton X-100，质量分数为

2.5%蔗糖的pH7.5的0.5mol/L的磷酸钾盐缓冲液；

3）PEG-6000；

4）氯化钠NaCl；

5）Triton X-100；

6）内含质量分数为0.01％Triton X-100的pH7.5的0.01mol/L KPB；

7）400～600目的金刚砂；

8）pH7.0的0.01mol/L磷酸缓冲液。

5.权利要求3或4所述的利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒的使用方法，其特征在于包括喷施接种薇甘菊萎蔫病毒控制薇甘菊和薇甘菊萎蔫病毒的扩繁两部分。

6.根据权利要求5所述的利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述的喷施接种薇甘菊萎蔫病毒包括以下步骤：（1）将薇甘菊萎蔫病毒毒原，利用磷酸缓冲液稀释后，在25-27℃，常规汁液摩擦接种，当蚕豆幼苗具有3～4片真叶时，在顶部的第1片和第2片真叶上均匀地洒一层石英砂，用齐头毛笔蘸取接种液在接种叶上轻轻摩擦，随后用蒸馏水冲洗掉叶片上残留的物质；薇甘菊萎蔫病毒在蚕豆上繁殖，7-10d后采取病叶；

（2）按每1g鲜病叶加入30～50mL0.01mol/L磷酸缓冲液的比例，充分研磨，3000r/min离心15min，取上清液备用；

（3）每100mL的上清液中加入0.5g400～600目的金刚砂，充分混匀，利用喷枪进行喷2

施接种，喷嘴距幼苗叶片2cm，空气压缩机的工作压力为2～2.5kg/cm ；

（4）为确保接种成功，可喷施接种两次，相隔一天；接种时及接种后的温度以25-27℃为宜，有利于薇甘菊萎蔫病毒的侵染。

7.根据权利要求5所述的利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述的薇甘菊萎蔫病毒的增殖包括以下步骤：（1）将薇甘菊萎蔫病毒毒原，利用pH7.0的0.01mol/L磷酸缓冲液稀释后，在25-27℃，常规汁液摩擦接种，当蚕豆幼苗具有3～4片真叶时，在顶部的第1片和第2片真叶上均匀地洒一层石英砂，用齐头毛笔蘸取接种液在接种叶上轻轻摩擦，随后用蒸馏水冲洗掉叶片上残留的物质；薇甘菊萎蔫病毒在蚕豆上繁殖，7-10d后采取病叶；

（2）按病叶重量加入2倍体积预冷的内含体积分数为0.1％巯基乙醇，质量分数为

0.01％Triton X-100，质量分数为2.5%蔗糖的pH7.5的0.5mol/L的磷酸钾盐缓冲液，匀浆

2min，4℃静置1h，8000g离心20min；

（3）取上清液，加入PEG-6000、NaCl和Triton X-100，使其浓度分别达到质量分数为

6%、0.1mol/L、质量分数为2.5%，4℃下搅拌6h，8500g离心5min；

（4）取沉淀，用内含质量分数为0.01％Triton X-100的pH7.5的0.01mol/LKPB，充分悬浮，7000g离心10min；

（5）吸取上清液置于离心管，沉淀再悬浮离心，重复2次，合并上清液；

（6）上清液78000g超速离心2h；

（7）沉淀用pH7.5的0.01mol/L KPB悬浮，悬浮液低速离心后取上清液，得到提纯病毒液。

8.权利要求3或4所述的利用薇甘菊萎蔫病毒生物控制薇甘菊的试剂盒在控制薇甘菊生物入侵中应用。