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专利号: 2013102660035
申请人: 青岛科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-08-31
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高水分苜蓿青贮菌剂,其特征在于:活性成分为保藏号为CGMCC NO. 7469的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)WN5和保藏号为CGMCC NO. 7470 的干酪乳杆菌SN3(Lactobacillus casei);

-20°C条件下,各取植物乳杆菌WN5和干酪乳杆菌SN3 5微升注入MRS固体培养基上,涂布,在温度37°C的条件下培养12~14小时;用接种环挑取MRS固体培养基上的单菌落,接种于装有5毫升MRS培养基的10毫升试管中,在温度37°C的条件下培养16~

10

18小时得到活化的乳酸菌,此时,每毫升MRS液体培养基中至少含有0.993 × 10 cfu乳酸菌;

将上述培养的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum) WN5 CGMCC NO. 7469和干酪乳杆菌 (Lactobacillus casei) SN3 CGMCC NO.7470 的菌液按 cfu 比为 1: (1-2) 的比例进行混合得到进行共同培养的种子液,按10%的接种量,将混合后的上述种子液接种于不含碳酸钙的MRS液体培养基中,37°C静止培养14小时~20小时,使每毫升液体培养基

10 11

中菌体密度达到 0.993 × 10 cfu ~ 0.832 × 10 cfu;

将上述青贮菌剂应用到高水分苜蓿青贮时,将苜蓿切割为长度5~8cm,每公斤高水分苜蓿加入30~35ml青贮菌剂,翻拌均匀;然后,把处理后的青贮苜蓿装入青贮器中压实、盖上盖子,常温下放置;所述高水分苜蓿的水分含量≤81.7%,刈割期为苜蓿主茎高度大于40cm的苗期至成熟期之间;青贮时间≤240天;

所述MRS培养基每升的组分及含量为: 蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、 葡萄糖 10 g/L、蔗糖 15 g/L、牛肉膏10 g/L、柠檬酸氢二铵 2 g/L、乙酸钠 5 g/L、丙酮酸钠0.18 g/L、L-半胱胺酸盐酸盐 0.05g/L、血红素0.5 g/L、维生素K2 2g/L、碳酸钙 10 g/L、K2HPO4 2 g/L、MgSO4·7H2O 0.58 g/L、MnSO4·H2O 0.25 g/L、Tween-80 1ml/L;其pH值为6.4,在

121°C灭菌15分钟制得。