1.一种利用二甲酚橙琼脂平板定量检测L-氨基酸氧化酶活力的方法,所述方法包括:(1)二甲酚橙琼脂平板的制备:将1mmol/L的FeSO4水溶液、0.6mmol/L的二甲酚橙水溶液与40g/L的琼脂水溶液以体积比1:1:2混合,摇匀,煮沸溶解,倒平板,冷却凝固后制成二甲酚橙琼脂平板;
(2)待测液的制备:在3mL、10mmol/L的L-亮氨酸底物溶液中,加入1μL的L-氨基酸氧化酶待测酶液作为酶源,于30℃、pH 7.5条件下反应0.5h,获得的反应液用水稀释即为待测液;
(3)L-氨基酸氧化酶活力的测定:用打孔器在二甲酚橙琼脂平板上打出直径6mm的小孔,然后往小孔中加入50μL待测液,室温静置60min后,测定紫红色圈的直径;
(4)标准曲线绘制:配制梯度浓度的过氧化氢溶液,按照步骤(3)方法进行检测,以过氧化氢浓度为横坐标、紫红色圈直径为纵坐标,绘制标准曲线;
(5)结果判定:根据待测液的紫红色圈直径,对照标准曲线,获得待测液中过氧化氢的浓度值,从而获得L-氨基酸氧化酶活力数据。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(2)中所述L-氨基酸氧化酶待测酶液来自东部菱背响尾蛇(Crotalus adamanteus)。