1.叶酸-腺病毒肿瘤靶向性复合物,其特征是:为FA-Ad5-TRAIL, FA 是叶酸,Ad5-TRAIL为用于肿瘤治疗的腺病毒Ad5-TRAIL,叶酸分子通过酰胺键与腺病毒Ad5-TRAIL的衣壳蛋白表面连接;
其结构式为:
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所述叶酸-腺病毒肿瘤靶向性复合物的制备方法为:
FA 在N,N'-二环己基碳二亚胺的催化下与N-羟基琥珀酰亚胺反应生成活化后的叶酸FA-NHS;活化后的叶酸FA-NHS与腺病毒Ad5-TRAIL在缓冲溶液中搅拌反应,使活化后的叶酸FA-NHS与腺病毒Ad5-TRAIL衣壳蛋白的氨基反应构成叶酸-腺病毒肿瘤靶向性复合物,即FA-Ad5-TRAIL;
具体包括以下步骤:
1)、称取叶酸溶于无水二甲基亚砜中,加入N,N'-二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺,叶酸:N,N'-二环己基碳二亚胺:N-羟基琥珀酰亚胺=1:1.1~1.3:1.8~2.2 的摩尔比,避光40~50℃搅拌10~14小时;
反应结束,离心;所得的上清用丙酮萃取活化的叶酸,离心,所得的沉淀为活化的叶酸FA-NHS;
2)、将活化的叶酸FA-NHS溶于Tris 缓冲液中,并加入Ad5-TRAIL的Tris 溶液,叶酸: 9
Ad5-TRAIL的摩尔比=10:0.95~1.05;3~5 ℃搅拌2.5~3.5h,将反应液经G50纯化,得到纯化的FA-Ad5-TRAIL。