1.抗前列腺特异性抗原的杂交瘤细胞株，其保藏号分别为CCTCC C201202和CCTCCC201208。

2.抗前列腺特异性抗原的单克隆抗体，分别由保藏号为CCTCC C201202和CCTCC C201208的杂交瘤细胞系所分泌，所述单克隆抗体命名为3-20-1和3-26-1。

3.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于：将Balb/c小鼠免疫

3次后，在细胞融合前3天作最后一次加强免疫，采用ELISA法分2步进行筛选融合细胞：第一步采用间接ELISA法筛选出抗前列腺特异性抗原PSA的阳性孔；第二步采用间接竞争ELISA法对第一步筛选出的阳性孔培养液进行检测，选择吸光度和灵敏度较高的阳性孔，采用有限稀释法进行克隆，克隆后10天左右采用同样的两步筛选法进行检测，如此重复3次后，最后筛选出2株杂交瘤细胞系。

4.如权利要求2所述的抗前列腺特异性抗原单克隆抗体的应用，即利用所述的单克隆抗体的双抗体夹心法ELISA检测t-PSA，夹心法两两配对的抗体来源于细胞株3-26-1和

3-20-1，其步骤包括：

(1)以所述的两两配对的单克隆抗体之一包被；

(2)加入待测样品孵育；

(3)以所述的两两配对的HRP标记的另一株单克隆抗体作为二抗，加入反应体系；

(4)洗涤后加入酶反应底物，以450nm读取OD值；

(5)结果表明检测的灵敏度很高。

5.一种检测血清中t-PSA含量的试剂盒，包括：包被有抗前列腺特异性抗原抗体的不透明聚苯乙烯板；前列腺特异性抗原系列标准品；酶标记的前列腺特异性抗原另一株单克隆抗体；上述酶所作用的化学发光底物A液和B液以及洗涤液。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：不透明聚苯乙烯板采用直接物理吸附法包被单克隆抗体，包被液是磷酸盐缓冲液中；另一株前列腺特异性抗原单克隆抗体和辣根过氧化酶偶联形成酶标记抗体，采用的是改良的过碘酸钠法进行标记；前列腺特异性抗原系列标准品以小牛血清为基质，加入前列腺特异性抗原纯品配置而成；发光底物A、B为HRP-Luminol发光体系。

7.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：标记抗体所用的标记酶是辣根过氧化酶，用的是高碘酸钠氧化法，所得酶标记抗体最佳的工作浓度是1∶2000；包被有抗前列腺抗原抗体的不透明聚苯乙烯板采用的是直接物理吸附法包被；发光液A液用硼砂7.99g，硼酸

3.46g，鲁米诺0.28g，对碘苯酚0.07g，加工艺用水定容至700mL，避光保存；发光底物B液由下列成分组成：硼砂7.99g，硼酸3.46g，过氧化脲0.07g加工艺用水定容至700mL。

8.如权利要求5-7所述试剂盒的制备方法，包括以下步骤：(1)标准品的配制和浓度的校正

将前列腺特异性抗原t-PSA纯品，加入标准品稀释液，配制一高浓度标准品浓液，采用逐低稀释的方法稀释到各浓度，配制成0、2.5、5、15、45、100ng/mL的系列标准品，标准品用国家标准校正。

(2)包被

采用0.5mol/L，pH值为9.5的碳酸盐缓冲液与适当浓度的前列腺特异性抗原单抗混合成抗体浓度是1μg/mL包被液，以100μL/孔包被在不透明的聚苯乙烯板上，4℃孵育过夜；

(3)洗板

用PBS-T洗液洗板孔2次；

(4)封闭

封闭液包含NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4.12H2O 2.9g，KH2PO4 0.2g，蔗糖20.00g，proclin300 1.00ml，BSA 20.00g，封闭液的PH值为7.3-7.5，150μL/孔封闭，湿盒孵育

2h；

(5)干燥

去除封闭液，过夜干燥。

(6)组装为成品

将聚苯乙烯板子放入铝箔袋中并放入干燥剂，密封保存。