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专利号: 2010105342312
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一株不对称制备(S)-苯基乙二醇的重组菌,其分类命名为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)SCRⅡG ,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC No.4198。

2.利用重组菌CGMCC No.4198不对称转化制备 (S)-苯基乙二醇的方法,其特征在于不对称转化反应条件:在0.1 mol/L pH 5.5的醋酸缓冲液中,加质量/体积比5%葡萄糖,底物2-羟基苯乙酮的浓度为6 mg/mL,重组菌细胞浓度为0.1 g/mL,不加辅助底物,反应温度为35℃,反应时间为24 h,转速150 r/min,重组菌菌体重复利用十个批次。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于重组菌的培养

BMGY培养基,以质量/体积%计:酵母膏1%,蛋白胨2%, 甘油1%,pH 6.0、100 mmol/L-5磷酸缓冲液10%,YNB 1.34%,生物素4×10 %,用去离子水补足至100%;

BMMY培养基,以质量/体积%计:酵母膏1%,蛋白胨2%,甲醇0.5%, pH 6.0、100 mmol/-5 L磷酸缓冲液10%,YNB 1.34%,生物素4×10 %,用去离子水补足至100%;

培养条件:将重组菌CGMCC No.4198按1%的接种量接种于装有25 mL BMGY培养基的

100 mL摇瓶中,在28℃、250 r/min的条件下,培养至菌浓OD600=2-6;室温3000 g离心5 min,收集菌体,用100 mL BMMY重悬菌体,使OD600为1.0,置于500 mL的摇瓶中,在28℃、

250 r/min的条件下培养,每12 h,按培养基质量/体积%计添加甲醇0.5%至培养基中,培养96h,10,000 rpm离心10 min,沉淀用生理盐水洗涤两次,收集得到重组菌全细胞。