1.一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,该方法先用70%乙醇回流提取干燥的多花蒿地上部分,之后上样至平衡好的D101型大孔吸附树脂柱,用水、20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,得Fr.Ⅰ~Fr.Ⅳ四个流分;将Fr.Ⅱ至Fr.Ⅳ分别进行聚酰胺柱色谱分离,用20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,分别得到三个流分,即Fr.Ⅱ-1~Fr.Ⅱ-3、Fr.Ⅲ-1~Fr.Ⅲ-3、Fr. Ⅳ-1~Fr. Ⅳ-3;将Fr.Ⅱ-1、Fr.Ⅱ-2经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,分别得到五个流分;将Fr.Ⅲ-1至Fr.Ⅲ-3经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,分别得到三个流分;所得流分中共有7个黄酮类化合物,分别为异鼠李素-3,7-二-O-β-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷、芒柄花素、异泽兰黄素、泽兰黄酮、三粒小麦黄酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮。
2.根据权利要求1所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
步骤1.干燥的多花蒿地上部分用70%乙醇回流提取,提取液减压浓缩得浸膏;
步骤2.将浸膏分散于水中,上样至平衡好的D101型大孔吸附树脂柱,用水、20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,每个洗脱部分单独作为1个流分,分别标记为Fr.Ⅰ~Fr.Ⅳ;
步骤3.将步骤2得到的Fr.Ⅱ流分进行聚酰胺柱色谱分离,用20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,每个洗脱部分单独作为1个流分,标记为Fr.Ⅱ-1~Fr.Ⅱ-3;
步骤4.将步骤2得到的Fr.Ⅲ流分进行聚酰胺柱色谱分离,用20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,每个洗脱部分单独作为1个流分,分别标记为Fr.Ⅲ-1~Fr.Ⅲ-3;
步骤5.将步骤2得到的Fr.Ⅳ流分进行聚酰胺柱色谱分离,用20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液依次洗脱,每个洗脱部分单独作为1个流分,分别标记为Fr. Ⅳ-1~Fr. Ⅳ-3;静置过夜后,Fr. Ⅳ-1中析出淡黄色粉末,即4',5,7,8-四甲氧基黄酮;
步骤6.将步骤3得到的Fr.Ⅱ-1经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,收集流分,TLC法检测每个流分,合并斑点相同的流分后,得到5个流分,分别标记为Fr.Ⅱ-1-1~Fr.Ⅱ-1-5;静置过夜后,Fr.Ⅱ-1-2中析出黄色粉末,即异鼠李素-3,7-二-O-β-葡萄糖苷;Fr.Ⅱ-1-5中析出黄色粉末,即槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷;
步骤7.将步骤3得到的Fr.Ⅱ-2经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,收集流分,TLC法检测每个流分,合并斑点相同的流分后,得到5个流分,分别标记为Fr.Ⅱ-2-1~Fr.Ⅱ-2-5;静置过夜后,Fr.Ⅱ-2-3中析出白色粉末,即芒柄花素;
步骤8.将步骤4得到的Fr.Ⅲ-1经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,收集流分,TLC法检测每个流分,合并斑点相同的流分后,得到3个流分,分别标记为Fr.Ⅲ-1-1~Fr.Ⅲ-1-3;静置过夜后,Fr.Ⅲ-1-2中析出黄色粉末,即异泽兰黄素;
步骤9.将步骤4得到的Fr.Ⅲ-2经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,收集流分,TLC法检测每个流分,合并斑点相同的流分后,得到3个流分,分别标记为Fr.Ⅲ-2-1~Fr.Ⅲ-2-3;静置过夜后,Fr.Ⅲ-2-1中析出淡黄色针状结晶,即泽兰黄酮;
步骤10.将步骤4得到的Fr.Ⅲ-3经Sephadex LH-20柱进一步纯化,用无水乙醇洗脱,收集流分,TLC法检测每个流分,合并斑点相同的流分后,得到3个流分,分别标记为Fr.Ⅲ-3-1~Fr.Ⅲ-3-3;静置过夜后,Fr.Ⅲ-3-3中析出淡黄色针晶,即三粒小麦黄酮。
3.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤1用6倍量的70%乙醇回流提取3次,每次1h。
4.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤6中TLC法检测每个流分时采用聚酰胺薄膜,乙醇:水=1:1洗脱后,取出,晾干,紫外光灯366nm检视。
5.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤7中TLC法检测每个流分时采用聚酰胺薄膜,乙醇:水=2:1洗脱后,取出,晾干,紫外光灯366nm检视。
6.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤8中TLC法检测每个流分时采用聚酰胺薄膜,乙醇:水=1:1洗脱后,取出,晾干,紫外光灯366nm检视。
7.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤9中TLC法检测每个流分时采用聚酰胺薄膜,乙醇:水=4:1洗脱后,取出,晾干,紫外光灯366nm检视。
8.根据权利要求2所述的一种从多花蒿中提取分离黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤10中TLC法检测每个流分时采用聚酰胺薄膜,乙醇:水=4:1洗脱后,取出,晾干,紫外光灯366nm检视。