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专利号: 2025109706920
申请人: 吉林师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2025-12-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤1.制备对照提取物溶液;

步骤2.制备供试品提取液:

取供试品,置于锥形瓶中,加入0.5%甲酸水溶液,称重,超声处理,用0.5%甲酸水溶液补足失重,滤过,吸取续滤液,置量瓶中,用0.5%甲酸水溶液稀释至刻度;

步骤3.净化过程:

磁性萃取剂准备:称取磁性萃取剂颗粒,加入0.5%甲酸水溶液,制得萃取剂颗粒分散液,充分震荡萃取剂颗粒分散液,使萃取剂颗粒分散液保持均匀的悬浮状态;

平衡:移取萃取剂颗粒分散液于试管内,加0.5%甲酸水溶液,涡旋,将试管置于磁力架上,静置,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并丢弃残液;

上样:移取步骤2的供试品提取液于试管内,涡旋,将试管置于磁力架上,静置,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并弃去残液;

淋洗:移取甲醇于试管内,涡旋,将试管置于磁力架上,静置,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并弃去残液;

洗脱:移取8%氨水溶液于试管内,涡旋,将试管置于磁力架上,静置,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧,收集洗脱液,减压浓缩至干,加0.5%甲酸水溶液稀释至1mL,作为供试品溶液;

步骤4.色谱-质谱条件:

不使用色谱柱,色谱柱部分用二通接头代替;流动相:0.5%甲酸水溶液;流速:0.2 mL•分钟–1;进样量:1 μL;质谱离子源为电喷雾离子化源,正离子,多反应监测模式,毛细管电压3.5 kV,离子源温度150 ℃,去溶剂温度500 ℃。

2.根据权利要求1所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,步骤1的具体步骤为:称取马钱子总生物碱对照提取物,加0.5%甲酸水溶液使其溶解,制成含马钱子碱0.923μg·mL–1、士的宁1.009μg·mL–1的对照提取物储备溶液;再取对照提取物储备溶液1mL,加0.5%甲酸水溶液使溶解,并稀释至25mL。

3.根据权利要求1所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,步骤2的具体步骤为:药材粉碎后,过四号筛,取粉末0.2g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,加入0.5%甲酸水溶液50 mL,称定重量,超声处理10分钟,补足失重,滤过,吸取续滤液1mL,置100mL量瓶中,用0.5%甲酸水溶液稀释至刻度,作为供试品提取液。

4.根据权利要求1所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,步骤3的具体步骤为:磁性萃取剂准备:称取0.1g磁性萃取剂颗粒,置1.5mL离心管中,加入1mL 0.5%甲酸水溶液,制得萃取剂颗粒分散液,充分震荡萃取剂颗粒分散液,使分散液保持均匀的悬浮状态;

平衡:移取萃取剂颗粒分散液100μl于试管内,加0.5%甲酸水溶液1mL,涡旋1分钟,将试管置于磁力架上,静置30秒,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并丢弃残液;

上样:移取步骤2的供试品提取液100μl于试管内,涡旋1分钟,将试管置于磁力架上,静置30秒,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并弃去残液;

淋洗:移取甲醇1mL于试管内,涡旋1分钟,将试管置于磁力架上,静置30秒,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧;吸取并弃去残液;

洗脱:移取8%氨水溶液1mL于试管内,涡旋1分钟,将试管置于磁力架上,静置30秒,使磁性萃取剂颗粒被完全吸附于试管内壁一侧,收集洗脱液,减压浓缩至干,加0.5%甲酸水溶液稀释至1mL,作为供试品溶液。

5.根据权利要求1所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,马钱子碱的质谱参数为:母离子m/z为395.0,碎裂电压为195V,定量离子m/z为244.1,定性离子m/z为324.1,定量离子和定性离子的碰撞能量分别为44eV、37eV;

士的宁的质谱参数为:母离子m/z为336.0,碎裂电压为190V,定量离子m/z为185.1,定性离子m/z为156.2,定量离子和定性离子的碰撞能量分别为46eV、62eV。

6.根据权利要求3所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,步骤2超声处理的功率为300 W,频率为40 kHz。

7.根据权利要求4所述的马钱子药材中马钱子碱和士的宁的测定方法,其特征在于,步骤3中使用混合型阳离子交换MCX磁性萃取剂颗粒。