1.一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一:原料预处理:将新鲜山核桃副产物清洗干净后在真空干燥箱中干燥,粉碎,过筛;
步骤二:乙醇粗提:将步骤一得到的山核桃副产物粉末和乙醇混合,搅拌进行乙醇粗提;
将乙醇粗提后的溶液离心,离心获得的上清液通过减压过滤获得山核桃副产物粗多酚提取液;将离心获得的沉淀、减压过滤获得的滤渣再进行乙醇粗提、离心、减压过滤;合并山核桃副产物粗多酚提取液;将山核桃副产物粗多酚提取液减压旋转蒸发浓缩;
步骤三:样品吸附:固相萃取仪在外部气泵的作用下进行吸附;先用甲醇激活固相萃取仪后加入HCl以除去甲醇;再将步骤二得到的山核桃副产物粗多酚提取液加入活化后的固相萃取仪中进行吸附;然后加入HCl,待其全部通过后再加入乙酸乙酯去除未吸附的杂质;最后加入甲醇洗脱被吸附的多酚,收集山核桃副产物多酚提取液;
步骤四:探针型细胞破碎机处理:将步骤三收集的山核桃副产物多酚提取液进行探针型细胞破碎机处理;将经探针型细胞破碎机处理后的山核桃副产物多酚提取液减压旋转蒸发浓缩,得到山核桃副产物多酚提取物。
2.根据权利要求1所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤一中,所述山核桃副产物包括山核桃种皮、山核桃壳、山核桃蒲。
3.根据权利要求1或2所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤一中,将新鲜山核桃副产物清洗干净后在35-45℃的真空干燥箱中干燥40-50h,粉碎,过40-80目筛。
4.根据权利要求1或2所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤二中,将步骤一得到的山核桃副产物粉末和40-70v/v%乙醇按料液比1g:20-40mL混合,后置于35-45℃的电子恒温油浴锅中,500-800rpm搅拌1-2h进行乙醇粗提;将乙醇粗提后的溶液在4-15℃、6000-8000rpm条件下离心15-30min,离心获得的上清液通过-0.05--0.098MPa减压过滤获得山核桃副产物粗多酚提取液;将离心获得的沉淀、减压过滤获得的滤渣再进行1-3次乙醇粗提、离心、减压过滤;合并2-4次的山核桃副产物粗多酚提取液。
5.根据权利要求4所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤二中,将山核桃副产物粗多酚提取液于30-42℃、-0.05--0.098MPa的条件下减压旋转蒸发浓缩至原体积的10%-20%。
6.根据权利要求1或2所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤三中,固相萃取仪在外部气泵的作用下进行吸附,外部气泵的气流速率为0.5-10L/min,工作压力为0.1-0.5MPa,固相萃取仪的吸附速率为1-5mL/min,吸附温度为20-30℃。
7.根据权利要求6所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤三中,先用10-15mL甲醇激活固相萃取仪后加入15-35mL 0.01-0.1v/v%HCl,0.01-0.1v/v%HCl即100mL中含0.01-0.1mL浓盐酸,浓盐酸为36wt%~38wt%浓盐酸,以除去甲醇;再将20-40mL步骤二得到的山核桃副产物粗多酚提取液加入活化后的固相萃取仪中进行吸附;然后加入15-35mL 0.01-0.1v/v%HCl,0.01-0.1v/v%HCl即100mL中含0.01-0.1mL浓盐酸,浓盐酸为36wt%~38wt%浓盐酸,待其全部通过后再加入10-20mL乙酸乙酯去除未吸附的杂质;最后加入10-30mL甲醇洗脱被吸附的多酚,收集山核桃副产物多酚提取液。
8.根据权利要求1或2所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤四中,将步骤三收集的山核桃副产物多酚提取液进行探针型细胞破碎机处理,探针直径为25mm,激发电压为80-120V,振动频率为20-25kHz,振动幅度为10-70%,激发时间为5-30min,其中,开1s关1s,于冰浴下处理。
9.根据权利要求8所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤四中,振动幅度为40%,激发时间为10min。
10.根据权利要求8所述的一种固相萃取仪样品吸附联合探针型细胞破碎机处理捕获山核桃副产物多酚的方法,其特征在于,步骤四中,将经探针型细胞破碎机处理后的山核桃副产物多酚提取液于30-42℃、-0.05--0.098MPa的条件下减压旋转蒸发浓缩至原体积的10%-20%,得到山核桃副产物多酚提取物。