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专利号: 2024108069615
申请人: 烟台大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2026-10-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针,其特征在于,所述加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针的结构如式1所示:式1。

2.一种权利要求1所述加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮的制备:

将4-溴-1,8-萘二甲酸酐和邻苯二胺溶解于冰乙酸中,加热回流反应,反应结束后,将液冷却至室温,过滤收集固体得到中间化合物3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮粗产品;接着将所收集固体粗产品转移至碳酸氢钠饱和水溶液中,并继续过滤,所得固体依次用去离子水和分析纯级的乙醇冲洗,得到纯亮黄色固体3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮;

(2)3-(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮的制备:将上述得到的3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮溶解于乙二醇单乙醚溶剂中,接着加入过量的化合物N-甲基乙烷-1,2-二胺,回流反应;反应结束后,将反应液冷却至室温,接着加入适量的冰水,并用二氯甲烷萃取,收集有机相,减压蒸馏除去有机溶剂得到中间产物3-(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮的粗产品,所得粗产品进一步用柱色谱分离提纯,得到纯的中间产物3-(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮;

(3)加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针的制备:

将3-(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮和2-甲基-2-(2,4,5-三甲基-3,6-二氧代环己基-1,4-二烯-1-基)丙酸、EDCI、HOBT溶解在干燥的Et3N溶剂和DMF溶剂中,避光、氮气保护条件下反应;反应完成后,相反应液中加入适量冰水,接着用二氯甲烷萃取,收集有机相,用无水硫酸钠进行干燥,接着减压蒸馏出去有机溶剂得到加氢响应辅酶NAD(P)H荧光粗产品;所得到的粗产品进一步用柱色谱分离提纯,得到纯的红色粉末状加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针。

3.根据权利要求2所述加氢响应辅酶NADPH荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述4-溴-1,8-萘二甲酸酐和邻苯二胺的摩尔比为1:1~5,邻苯二胺与冰乙酸的摩尔体积比为1mmol:10~100mL;反应温度为100~120℃,反应时间为3~24 h。

4.根据权利要求2所述加氢响应辅酶NADPH荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮与N-甲基乙烷-1, 2-二胺的摩尔比为1:1~5;所述3-溴-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮与乙二醇单乙醚的摩尔体积比为1 mmol:5~20mL;回流反应时间为5~10 h,温度为100~150℃,回流反应条件为避光;色谱柱分离的条件为:硅胶柱色谱,流动相为甲醇:二氯甲烷=1:5。

5.根据权利要求2所述加氢响应辅酶NADPH荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述3-(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-7H-苯并[d]苯并[4,5]咪唑并[2,1-a]异喹啉-7-酮、2-甲基-2-(2,4,5-三甲基-3,6-二氧代环己基-1,4-二烯-1-基)丙酸、Et3N、EDCI、HOBT的摩尔比为1 : 1~2 : 2~4 : 2~4,所述反应的时间为5~24 h;所述二氯甲烷萃取的次数为2~5次;所述柱色谱提纯的条件为:硅胶柱色谱,流动相为甲醇:二氯甲烷 =1:10。

6.一种加氢响应辅酶NAD(P)H荧光传感器,其特征在于,所述加氢响应辅酶NAD(P)H荧光传感器由权利要求1所述加氢响应辅酶NAD(P)H荧光探针与催化剂联合制备而成;

所述催化剂为2-吡啶苯酰胺五甲基环戊二烯基有机铱催化剂,其结构为:

。

7.一种权利要求6所述加氢响应辅酶NAD(P)H荧光传感器在制备细胞内加氢响应辅酶NAD(P)H荧光成像分析试剂中的应用。