1.一种高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针,其特征在于,其分子式为:C42H54F3N2O5S+,结构式为:。
2.一种权利要求1所述高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针的制备方法,其特征在于,包括以下制备步骤:(1)在冰浴下向容器中加入20mL无水DMF与20mL无水DCM的混合溶液,再在惰性气体保护下使用恒压滴液漏斗缓慢滴入15mLPOCl3和20mLDCM的混合液,最后将5.0g4-环己酮羧酸用无水DMF溶解后,逐滴加至反应中,升温至50℃,回流5h;反应完成后,将反应液倒入冰水当中,放入-20℃冰箱过夜,室温静置后析出黄色固体,抽滤,干燥,无需进一步纯化得到6.31g化合物2,化合物2的结构式为:;
(2)将400mg化合物2加入100mL圆底烧瓶中,加入150mg的醋酸钠和340mg 2-甲基苯并吲哚碘盐,40mL乙酸酐作为溶剂,氮气保护下升温至90℃,反应2h,旋蒸除去溶剂,柱层析分离提纯,最后得到644mg绿色固体化合物3,固体化合物3的结构式为:;
(3)将500mg化合物3,220mg十四胺,500mgHATU用10mLDCM溶解,加入80μL三乙胺,氮气保护下常温反应过夜,减压旋蒸除去溶剂,柱层析分离提纯,用DCM洗脱,最后得到540mg绿色固体化合物4,化合物4的结构式为:;
(4)将75mg间苯二酚和83mg碳酸钾溶于5mL乙腈中,室温搅拌10min,后加入350mg化合物4,升温至50℃反应4h,反应完成后减压旋干,柱层析分离,用DCM洗脱,最后得到124mg蓝绿色固体化合物5,化合物5的结构式为:;
(5)将100mg化合物5用5mLDCM溶解,在冰浴下加入100μL三氟甲基磺酸苷和30μL三乙胺,0℃搅拌10min后室温下搅拌30min;减压旋干,柱层析分离,用DCM洗脱,最后得到80mg紫色固体化合物6,即为目标探针,结构式为:。
3.根据权利要求2所述高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中柱层析分离提纯,洗脱剂组成为DCM:C2H5OH=(10:1)。
4.根据权利要求2所述高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针的制备方法,其特征在于,在使用化合物3,4,5之前,用硅胶层析柱进一步纯化。
5.根据权利要求2所述高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(5)三乙胺的的加入方式为滴加;得到目标探针化合物6后,使用硅胶层析柱进一步纯化。
6.一种权利要求1所述高尔基体靶向双检测超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子的荧光探针在非疾病诊断和治疗中的应用,用于检测水溶液及离体生物样品中的超氧阴离子和过氧化亚硝酰离子。