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专利号: 2024101421815
申请人: 上海海事大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2026-04-06
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高海洋微生物代谢活性的方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)基础培养基活化培养:将海洋假交替单胞菌接种至斜面培养基上在25‑35℃下活化培养;接着将斜面培养基菌种转接至液体培养基中进行摇瓶培养,培养温度为25‑35℃,转速120‑180rpm,培养时间24h‑48h,得活化培养液;摇瓶培养添加液体培养基总量0.3‑0.5%的甘氨酸;

2)发酵培养基刺激培养:将活化培养液按照4‑6%的接种量转接至2216E发酵培养基中,在25‑35℃、120‑180  rpm下刺激培养48‑72h得到发酵培养液;

所述刺激培养的过程中分批添加刺激剂,其中培养开始0‑12h,向发酵培养基中加入0.5‑1.0%的壳聚糖适应性发酵;培养进行到24h‑36h时,向发酵培养基中继续添加刺激剂,所述刺激剂的组成和配比为:壳聚糖:酪蛋白的质量比为2:3,添加量为1.5%‑2.0%;

3)植物乳杆菌共育培养:将活化培养后的植物乳杆菌P8以5‑8%的添加量加入到步骤2)的发酵培养液中共育培养,其中植物乳杆菌活菌数大于1×109  CFU/ml,共育培养时间为24h,温度30‑35℃,每隔6h搅拌20S,即得代谢活性提高的抗腐蚀细菌液。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述海洋假交替单胞菌为解脂假交替单胞菌(Pseudoalteromonas  lipolytica)。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中斜面培养基的组成为:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,琼脂20.0g,人工海水1000ml,调pH至7.4~7.8。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中液体培养基的组成为:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,人工海水1000ml,调pH至7.4~7.8。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)中2216E发酵培养基的具体组成为蛋白胨5 .0g,酵母粉1 .0  g,柠檬酸铁0 .1  g,氯化钠19 .45  g,氯化镁5 .98  g,硫酸钠3.24  g,氯化钙1.8  g,氯化钾0.55  g,碳酸钠0.16  g,溴化钾0.08  g,氯化锶0.034  g,硼酸0.022  g,硅酸钠0.004  g,氟化钠0.0024  g,硝酸铵0.0016  g,磷酸氢二钠0.008  g,蒸馏水1000ml,调pH值至7.4~7.8。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)中植物乳杆菌活化培养的方式为将植物乳杆菌P8菌粉经MRS培养基,在32℃~38℃下培养12~24h制备得到。

7.一种采用权利要求1‑6任一所述方法制备得到的海洋抗腐蚀细菌液。8.根据权利要求7所述的海洋抗腐蚀细菌液,其特征在于细菌液中胞外多糖的含量为14‑17g/L。

9.一种权利要求7或8所述海洋抗腐蚀细菌液在抑制海洋环境中金属腐蚀中的应用。