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专利号: 2023114466843
申请人: 黄理鑫
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2026-01-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于琼脂糖的细胞流式微流体装置的制造方法,其特征在于:包括:

步骤A、操作环境确认;步骤B、琼脂糖除菌添加;步骤C、低温超声震荡;步骤D、琼脂糖高温溶化;步骤E、注入微流体模具;步骤F、高温超声震荡;步骤G、真空除气泡;步骤H、琼脂糖芯片脱模;步骤I、冷等离子体表面激活;步骤J、载玻片表面钝化、琼脂糖微流体装置组装;

所述步骤C具体为:在数字加热超声波浴器的浴缸中加入0℃的冰水混合物,并将含有琼脂糖粉末的烧杯置于浴缸中、进行13~17min的超声浴;

所述步骤E具体为:步骤D高温溶化后、取出带有琼脂糖的烧杯并去掉导热箔纸,将粘稠液态的琼脂糖溶液倒入预先准备的、经灭菌处理的芯片模具中;

所述步骤F具体为:首先,向数字加热超声波浴器的浴缸中加入水、并加热至84~86℃,将步骤E中含有粘稠液态的琼脂糖溶液的芯片模具浮于浴缸上,在84~86℃保温状态下、进行1min的超声波浴;

所述步骤I具体为:首先将等离子体表面处理仪腔体内的空气置换为氧气,然后将载玻片放置在富含氧气的等离子体表面处理仪中,再将氧气进行抽真空、真空度不超过30mTorr,进行9~11min的表面修饰与激活;

所述步骤J具体为:

载玻片表面钝化:在步骤I冷等离子体表面激活结束后、迅速取出载玻片,并在1min内、将浓度为5%的聚乙烯吡咯烷酮溶液均匀地敷抹在载玻片被等离子体处理过的表面上,随后置于生物安全柜中静置1h,再用超纯水清洗载玻片上残余溶液、并在生物安全柜中静置晾干,完成载玻片表面钝化;

琼脂糖微流体装置组装:将表面钝化后的载玻片与步骤H中处理后的琼脂糖芯片对齐贴合,轻轻按压以确保在二者接触面明显无气泡存在,之后通过夹紧工装完成琼脂糖微流体装置的组装。

2.根据权利要求1所述的一种基于琼脂糖的细胞流式微流体装置的制造方法,其特征在于:所述步骤A具体为:激活生物安全柜或清洁室,确保操作环境至少满足ISO 14644无尘室环境监测的ISO 4级标准;操作全程佩戴清洁手套、护面罩。

3.根据权利要求1或2所述的一种基于琼脂糖的细胞流式微流体装置的制造方法,其特征在于:所述步骤B具体为:首先,从超纯水机中取出去离子的超纯水至洁净的玻璃烧杯中;然后,使用电动移液器将超纯水从玻璃烧杯中吸出,并将除菌过滤膜套接在电动移液器的管口;再驱动电动移液器将超纯水通过除菌过滤膜移至另一纯净的玻璃烧杯中;最后,在生物安全柜内将琼脂糖颗粒添加至盛有滤后超纯水的玻璃烧杯内,无需搅拌、并立即用封口膜封住烧杯。

4.根据权利要求3所述的一种基于琼脂糖的细胞流式微流体装置的制造方法,其特征在于:所述步骤D具体为:首先,擦干步骤C中由浴缸中取出的带有琼脂糖的烧杯外表面;然后,取下封口膜并将其更换为洁净的导热箔纸,并将烧杯放入烘箱中,提前将烘箱温度加热至130~135℃,保温运行13~17min,完成琼脂糖的溶化。

5.根据权利要求4所述的一种基于琼脂糖的细胞流式微流体装置的制造方法,其特征在于:所述步骤G具体为:首先在真空玻璃皿的腔体中垫上隔温棉,然后将步骤F中盛有熔融琼脂糖溶液的芯片模具迅速转移至真空玻璃皿的腔体中;最后密封真空玻璃皿、启动叶片泵,抽真空9~11min。