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专利号: 2022114633697
申请人: 无锡代际生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 染料;涂料;抛光剂;天然树脂;黏合剂;其他类目不包含的组合物;其他类目不包含的材料的应用
更新日期:2025-08-19
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,其通过以下方法制备得到:

1)制备N‑十二烷基葡萄糖酰胺;

1‑1)取D‑葡萄糖酸‑δ‑内酯,加入甲醇中,搅拌溶解;

1‑2)将十六胺加入到甲醇中,搅拌溶解;

1‑3)将步骤1‑1)和步骤1‑2)的产物混合反应,反应结束后,产物冷却至室温,过滤,固体产物用乙醇水溶液洗涤后真空干燥,得到N‑十六烷基葡萄糖酰胺;

2)采用包括N‑十二烷基葡萄糖酰胺、邻苯二胺、三氟化硼乙醚和水杨酸在内的原料通过水热法合成碳点,即所述纳米荧光探针;

所述步骤2)具体包括:

2‑1)将N‑十二烷基葡萄糖酰胺、邻苯二胺、三氟化硼乙醚和水杨酸加入到超纯水与乙醇的混合液中,超声处理;

2‑2)将步骤2‑1)得到的混合物转移到聚四氟乙烯衬底的反应釜中,加热反应;

2‑3)反应结束后冷却至室温,产物用滤膜过滤;

2‑4)将步骤2‑3)的滤液离心,离心所得固体真空干燥,得到碳点,即所述纳米荧光探针。

2.根据权利要求1所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤1)具体包括:

1‑1)取D‑葡萄糖酸‑δ‑内酯,加入甲醇中,于55‑70℃下搅拌溶解;

1‑2)将十六胺加入到甲醇中,搅拌溶解;

1‑3)将步骤1‑1)和步骤1‑2)的产物混合,50‑80℃下反应1‑6h,反应结束后,产物冷却至室温,过滤,固体产物用乙醇水溶液洗涤,45‑7℃下真空干燥,得到N‑十六烷基葡萄糖酰胺。

3.根据权利要求2所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤1)具体包括:

1‑1)取30mmol D‑葡萄糖酸‑δ‑内酯,加入45mL甲醇,加热至65℃搅拌至溶解;

1‑2)将35mmol十六胺加入到40mL甲醇中,搅拌溶解;

1‑3)将步骤1‑1)和步骤1‑2)的产物混合,65℃下反应3h,反应结束后,产物冷却至室温,过滤,固体产物用乙醇水溶液洗涤,50℃下真空干燥,得到N‑十六烷基葡萄糖酰胺,乙醇水溶液中乙醇与水的体积比为8:2。

4.根据权利要求1所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤2)具体包括:

2‑1)将N‑十二烷基葡萄糖酰胺、邻苯二胺、三氟化硼乙醚和水杨酸加入到超纯水与乙醇的混合液中,超声2‑10min;

2‑2)将步骤2‑1)得到的混合物转移到聚四氟乙烯衬底的反应釜中,170‑240℃下反应

10‑24h;

2‑3)反应结束后冷却至室温,产物用0.18‑0.40μm的滤膜过滤;

2‑4)将步骤2‑3)的滤液在7000‑15000 rpm下离心3‑20min,离心所得固体在45‑70℃下真空干燥,得到碳点,即所述纳米荧光探针。

5.根据权利要求4所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤2‑1)中,超纯水与乙醇的体积比为7:3‑2:8。

6.根据权利要求5所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤2)具体包括:

2‑1)将N‑十六烷基葡萄糖酰胺110mg、邻苯二胺65mg,三氟化硼乙醚220mg和水杨酸

80mg加入到400mL超纯水与乙醇的混合液中,超声8min;

2‑2)将步骤2‑1)得到的混合物转移到500mL的聚四氟乙烯衬底的反应釜中,220℃下反应16h;

2‑3)反应结束后冷却至室温,产物用0.22μm的滤膜过滤;

2‑4)将步骤2‑3)的滤液在11000 rpm下离心12min,离心所得固体在50℃下真空干燥,得到碳点,即所述纳米荧光探针。

7.根据权利要求6所述的用于脂滴标记的纳米荧光探针,其特征在于,所述步骤2‑1)中,超纯水与乙醇的体积比为4:6。

8.一种如权利要求1‑7中任意一项所述纳米荧光探针在脂滴靶向染色中的应用。

9.一种如权利要求1‑7中任意一项所述纳米荧光探针在区分癌细胞和正常细胞中的应用,具体的应用方法为:S1、将所述纳米荧光探针制备成纳米荧光探针溶液,然后对受检细胞进行染色,孵育;

S2、测量受检细胞在414nm的激发光下,524nm处的荧光强度I524;测量受检细胞在468nm的激发光下,655nm处的荧光强度I655;

S3、计算癌变判断值K=I524/I655,当K值高于设定的阈值KT时,判断该受检细胞存在癌变风险,且K值越大,代表癌变风险越高。