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专利号: 2022109806164
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种分泌丙酸睾丸素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株已于2022年03月03日,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.45120,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.一种分泌丙酸睾丸素单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备丙酸睾丸素半抗原及丙酸睾丸素完全抗原,将获得的丙酸睾丸素完全抗原与弗氏佐剂进行乳化得到免疫原1,丙酸睾丸素完全抗原与不完全弗氏佐剂乳化得到免疫原

2;

(2)将步骤(1)所得免疫原1对动物进行首次皮下免疫,并用免疫原2进行加强免疫;

(3)对经过步骤(2)免疫过程的动物进行采血,筛选出血清中丙酸睾丸素抗体灵敏度高的动物;

(4)对步骤(3)筛选出的动物进行冲刺免疫,冲刺免疫采用不含弗氏佐剂的丙酸睾丸素完全抗原;

(5)将步骤(4)冲刺免疫后的动物的脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合,得到所述分泌丙酸睾丸素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述丙酸睾丸素半抗原的分子式为:

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述丙酸睾丸素完全抗原通过以下方法制备得到:将丙酸睾丸素半抗原、N‑羟基琥珀酰亚胺及1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐溶解于有机溶剂中,搅拌反应,得到活化液,将活化液加入到偶联用蛋白溶液中进行反应,得到所述丙酸睾丸素完全抗原。

5.权利要求1中所述杂交瘤细胞株在制备丙酸睾丸素单克隆抗体中的应用。

6.一种丙酸睾丸素单克隆抗体,其特征在于,所述丙酸睾丸素单克隆抗体是由权利要求1中所述杂交瘤细胞株分泌获得。

7.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求6所述的丙酸睾丸素单克隆抗体在检测丙酸睾酮、睾酮、甲基睾酮和苯丙酸睾丸素中的一种或多种中的应用。

8.一种组合物,其特征在于,所述组合物包含权利要求1所述的杂交瘤细胞株和/或权利要求6中所述的丙酸睾丸素单克隆抗体。

9.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求6所述的丙酸睾丸素单克隆抗体和权利要求7所述的组合物中的一种或多种。

10.如权利要求8所述的组合物、权利要求9所述的试剂盒在检测丙酸睾酮、睾酮、甲基睾酮和苯丙酸睾丸素中的一种或多种中的应用。