欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 202210855056X
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种植物愈伤组织污染后的非损伤物理消毒和分离方法,其特征在于:包括以下方法步骤:

S1、首先将未污染的愈伤组织转移到无菌的愈伤培养基上,培养基为固体培养基则直接进入S2步骤;

S2、准备无菌的长颈三角瓶(4),长颈三角瓶(4)口配有双孔活塞(3),活塞中插入玻璃材质的导入管(2)和导出管(1);

S3、将受到污染的愈伤组织(10)转移到无菌的长颈三角瓶(4),用无菌水悬浮漂洗2~3次,用移液枪吸走漂洗后的无菌水;

S4、在长颈三角瓶(4)中加入无菌水,悬浮愈伤组织,之后盖上双孔活塞(3),双孔活塞(3)插有导入管(2)和导出管(1),在导入管(2)口处接一个转接头(5);

S5、准备一台采用高频电源的低温等离子体发生装置,使用轴流式的放电装置进行放电,在尾端出口处收集等离子体;

S6、用橡胶导管将低温等离子体发生装置的尾端出气口与双孔活塞(3)上的导入管转接头(5)连通,将氧气电离产生的低温等离子体由尾端出口,经过橡胶导管、转接头(5)和导入管(2),进入长颈三角瓶(4)中,导入长颈三角瓶(4)中的低温等离子体气体在愈伤悬浮液中杀菌;

S7、低温等离子体处理完后拆下橡胶导管,在转接头(5)上接上注射器,利用注射器吸走低温等离子体处理后的无菌水,然后通过注射器将无菌的液体愈伤培养基导入长颈三角瓶(4)中;

S8、在酒精灯火焰上,对长颈三角瓶(4)和双孔活塞(3)进行火焰消毒,然后套上隔菌盖(6),通过盖内的塑料卡扣(8)固定在长颈三角瓶(4)口部,之后将带有隔菌盖(6)的长颈三角瓶(4)在控温摇床中进行悬浮培养;

S10、悬浮培养完成后,打开长颈三角瓶(4)盖子,用移液枪将液体培养基吸走,将预培养的愈伤组织转移到无菌滤纸上晾干,然后转移到装有固体培养基的培养皿(9),培养皿(9)封口后,在控温培养箱中无菌观察培养;

S11、无菌观察2~5天后,将愈伤组织转移到新的固体培养基或液体培养基中开展正常的科学研究。

2.根据权利要求1所述的一种植物愈伤组织污染后的非损伤物理消毒和分离方法,其特征在于:所述S5步骤中,放电方式为介质阻挡放电,铜棒电极的外径为5.8mm,外围被外径为38mm石英管包裹作为阻挡介质,放电间隙设计为5~6mm,气体采用氧气,进气流速控制在

1L/min。

3.根据权利要求1所述的一种植物愈伤组织污染后的非损伤物理消毒和分离方法,其特征在于:所述S5步骤中,轴流式放电装置全长20cm,上端封口,侧端进气。

4.一种植物愈伤组织污染后的非损伤物理消毒和分离装置,其特征在于:应用于权利要求1‑3任一项所述的一种植物愈伤组织污染后的非损伤物理消毒和分离方法,包括长颈三角瓶(4)、隔菌盖(6)和培养皿(9),所述长颈三角瓶(4)的顶端设置有双孔活塞(3),所述双孔活塞(3)一侧的孔内设置有导出管(1),所述双孔活塞(3)另一侧的孔内设置有导入管(2),所述导入管(2)的外端套设有转接头(5),用橡胶导管将低温等离子体发生装置的尾端出气口与双孔活塞(3)上的导入管转接头(5)连通,所述隔菌盖(6)的顶端中部设置有透气膜(7),所述隔菌盖(6)与双孔活塞(3)通过塑料卡扣(8)卡合。