1.一种信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针,其特征在于,荧光蛋白探针的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.如权利要求1所述的信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针的制备方法,其特征在
2+
于,将增强型绿色荧光蛋白发色团附近的203位、205位氨基酸突变为能与Hg 特异性结合的半胱氨酸,即得所述信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针。
3.如权利要求2所述的信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)利用引物扩增增强型绿色荧光蛋白的DNA序列;
2)将DNA序列与质粒pET30a连接,构建EGFP‑pET30a表达载体;
3)利用PCR技术对载体EGFP‑pET30a进行突变扩增,扩增产物与DpnI酶反应去除模板质粒,取酶切获得的突变质粒转化至大肠杆菌,筛选阳性克隆送去测序,获得正确突变的表达载体,利用正确突变的表达载体在工程菌中表达,获得信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针。
4.一种试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针。
5.如权利要求1所述的信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针在汞离子检测中的应用。
6.一种编码信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针的多核苷酸,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
7.如权利要求6所述的编码信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针的多核苷酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)利用引物扩增增强型绿色荧光蛋白的DNA序列;
2)将DNA序列与质粒pET30a连接,构建EGFP‑pET30a表达载体;
3)利用PCR技术对载体EGFP‑pET30a进行突变扩增,扩增产物与DpnI酶反应去除模板质粒,取酶切获得的突变质粒转化至大肠杆菌,筛选阳性克隆送去测序,获得正确突变的表达载体,即获得编码信号增强型检测汞离子的荧光蛋白探针的DNA。
8.一种表达载体,其特征在于,包括载体质粒和与载体质粒操作性连接的编码权利要求1所述氨基酸序列的核苷酸序列或者权利要求6所述的核苷酸序列,所述表达载体包括原核表达载体、真核表达载体或病毒载体。
9.一种宿主细胞,其特征在于,包含权利要求8所述的表达载体。