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专利号: 2022106427039
申请人: 南京涵台余生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:授权未缴费
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于治疗恶性肿瘤的药物组合物,特征在于所述药物组合物包括携带靶向HER 

2抗体的树突细胞外泌体,所述外泌体通过磷脂聚乙二醇琥珀酰亚胺酯交联剂与靶向HER 2抗体连接,所述靶向HER 2抗体为纳米抗体,所述纳米抗体包括如SEQ ID NO:1所示的CDR1、SEQ ID NO:2所示的CDR2和SEQ ID NO:3所示的CDR3。

2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

3.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述树突细胞外泌体的制备步骤包括:使用AIM‑V培养基在5%CO2在37℃培养箱中培养人DC细胞,当细胞融合度达到90%后,更换新鲜培养基,在5%CO2在37℃培养箱中培养48h;收集培养基,采用梯度离心法除去培养基中游离的活细胞、死细胞、细胞碎片;所得溶液采用0.22μm滤膜过滤,除去大颗粒杂质;

然后在4℃下10000g超速离心60min,弃去上清,使用无菌PBS洗涤3次,再4℃下10000g超速离心90min,收集沉淀获得树突细胞外泌体颗粒。

4.根据权利要求3所述的药物组合物,其特征在于,所述树突细胞外泌体的制备步骤包括:在DC细胞培养过程中加入诱导剂,所述诱导剂包括癌胚抗原CEA、糖类抗原CA125、IL‑

12、IL‑10、IFN‑γ、TGF‑β中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于,所述诱导剂包括癌胚抗原CEA、糖类抗原CA125和IL‑12。

6.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述树突细胞外泌体与靶向HER 2抗体的连接步骤包括:将溶解于有机溶剂二甲基亚砜中的磷脂聚乙二醇琥珀酰亚胺酯与HER 2纳米抗体按1:10‑10:1比例混合均匀,在4℃无菌环境中搅拌混合30min,然后将其在4℃下反应过夜,5000rpm离心10‑15min除去未反应的磷脂聚乙二醇琥珀酰亚胺酯,得到磷脂聚乙二醇琥珀酰亚胺酯‑HER 2纳米抗体复合物;将树突细胞外泌体溶于无菌磷酸盐缓冲溶液中得到树突细胞外泌体溶液,将所述复合物与树突细胞外泌体按1:5‑5:1比例混合均匀,在4℃下轻轻吸打混合均匀,37℃下反应2‑4h,4500rpm离心5min得到携带靶向HER 2纳米抗体的树突细胞外泌体。

7.权利要求1至6中任一项所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

8.如权利要求7所述的应用,所述肿瘤选自乳腺癌、肺癌、胃癌、结直肠癌、前列腺癌、头颈癌、胰腺癌、淋巴瘤、白血病和/或骨髓瘤中的一种或几种。

9.如权利要求8所述的应用,所述肿瘤选自乳腺癌。