1.一种火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)利用在线工具BIOPEP‑UWM对火麻仁蛋白进行虚拟酶解,得到火麻仁多肽库;
(2)通过PeptideRanker、Innovagen、ToxinPred和admetSAR程序对酶解后的火麻仁多肽的生物活性、水溶性、毒性、ADMET性质进行评价,建立火麻仁活性多肽肽库;
(3)利用MOE分子对接技术评价多肽与黄嘌呤氧化酶的结合方式,高通量筛选得到具有潜在黄嘌呤氧化酶抑制活性的候选火麻仁多肽序列;
(4)采用固相化学合成方法和抑制活性验证实验,对候选火麻仁多肽序列进行验证,得到所述黄嘌呤氧化酶抑制肽;
(5)采用计算机虚拟酶解对应的蛋白酶,对火麻仁多肽进行酶解得到所述黄嘌呤氧化酶抑制肽。
3.根据权利要求2所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述利用在线工具BIOPEP‑UWM对火麻仁蛋白进行虚拟酶解,选择的蛋白酶包括:chymotrypsin,trypsin,pepsin,proteinase K,pancreatic elastase,prolyl oligopeptidase,V‑8 protease,thermolysin,chymotrypsin C,plasmin,cathepsin G,clostripain,chymase,papain,ficin,leukocyte elastase,metridin,thrombin,pancreatic elastase II,stem bromelain,glutamyl endopeptidase II,oligopeptidase B,calpain 2,glycyl endopeptidase,oligopeptidase F,proteinase P1,Xaa‑Pro dipeptidase,coccolysin,subtilisin。
4.根据权利要求2所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述利用MOE分子对接技术评价多肽与黄嘌呤氧化酶的结合方式,高通量筛选得到具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的候选火麻仁多肽序列,包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8所示的多肽,分别对应DDNPRRFY、PRRFYI、YWCNNDG、EGFEWVSFK、PYY、FCFFL、QSCHFRTP、SADDEDNYYYGG。
5.根据权利要求2所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述利用MOE分子对接技术评价多肽与黄嘌呤氧化酶的结合方式,高通量筛选得到具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的候选火麻仁多肽为DDNPRRF、YWCNNDG,EGFEWVSFK、PYY。
6.根据权利要求2所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述利用MOE分子对接技术评价多肽与黄嘌呤氧化酶的结合方式,高通量筛选得到具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的候选火麻仁多肽为DDNPRRFY。
7.根据权利要求2所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(5)中选用Pancreatic elastase对火麻仁蛋白进行酶解,得到火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽。
8.根据权利要求1所述的火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(4)得到所述黄嘌呤氧化酶抑制肽的半抑制浓度IC50为2.10±0.06mg/mL,Ki值为0.48±
0.02mg/mL,表现为一种混合型抑制剂。