1.一种非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD,其特征在于:已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏名为单克隆细胞株AD,保藏编号为CGMCC19681。
2.根据权利要求1所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:非那西丁免疫小鼠通过细胞融合、HAT选择性培养基培养后,建立得到所述非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD;所述非那西丁免疫小鼠是由小鼠经非那西丁免疫原免疫所得。
3.根据权利要求2所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:所述非那西丁免疫原由Phe‑BA半抗原与载体蛋白偶联获得,其中,所述载体蛋白包括牛血清蛋白BSA、卵清蛋白OVA,对应的非那西丁免疫原包括Phe‑BA‑BSA、Phe‑BA‑OVA;所述Phe‑BA半抗原由对乙酰氨基酚与4‑溴丁酸乙酯反应后的产物经水解后得到,结构如下式所示:
4.根据权利要求3所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:所述Phe‑BA半抗原的制备方法为,按摩尔比计,将1equ.对乙酰氨基酚溶于二甲亚砜,加入4‑6equ.K2CO3,搅拌下加入2‑5equ.4‑溴丁酸乙酯,加热回流,80~120℃搅拌,待反应完全,降至室温,浓缩;加入NaOH溶液加热至70~80℃搅拌反应,降至室温,用HCl调节PH至4~
5,经萃取、纯化、干燥,得白色固体即为半抗原Phe‑BA。
5.根据权利要求2所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:所述非那西丁免疫小鼠的免疫方法为,通过颈背部皮下注射BALB/c小鼠,先用弗氏完全佐剂与非那西丁免疫原的等体积混合乳化液作为注射剂进行首次免疫,再用弗氏不完全佐剂与非那西丁免疫原的等体积混合乳化液作为注射剂进行数次加强免疫,最后一次用50μL经生理盐水稀释至0.5mg/mL的非那西丁免疫原进行冲刺免疫。
6.根据权利要求5所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:首次免疫的注射量为100μg/只,每次加强免疫的注射量为50μg/只,冲刺免疫的注射量为25μg/只;
首次免疫与第一次加强免疫之间间隔一个月,数次加强免疫之间间隔21天,所述加强免疫进行4~6次,优选5次。
7.根据权利要求2所述的非那西丁单克隆抗体杂交瘤细胞株AD的制备方法,其特征在于:所述细胞融合的具体方法为:通过聚乙二醇法将非那西丁完全抗原免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞融合,通过HAT培养基培养,利用间接ELISA检测阳性细胞孔,并进一步利用icELISA法测定阳性细胞孔的抑制效果,通过有限稀释法对有最好抑制的阳性细胞孔进行三次亚克隆,最终筛选获得杂交瘤细胞株AD。
8.一种非那西丁单克隆抗体,其特征在于:由权利要求1所述的或由权利要求2‑7任一所述方法制备的单克隆杂交瘤细胞株AD分泌产生。
9.根据权利要求8所述的非那西丁单克隆抗体的应用,其特征在于:用于制备食品安全检测中非那西丁残留量的分析检测用的检测主体,所述检测主体包括试剂、检测板、试剂盒。
10.根据权利要求9所述的非那西丁单克隆抗体的应用,其特征在于:所述检测主体中还包括有非那西丁包被原,所述非那西丁包被原是在Phe‑BA半抗原与载体蛋白偶联制备非那西丁免疫原时获得的,其中,所述载体蛋白包括牛血清蛋白BSA、卵清蛋白OVA,对应的非那西丁包被原包括Phe‑BA‑BSA、Phe‑BA‑OVA。