1.一种促凝血桃花有效成分的提取分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)以干燥、粉粹后的桃花为原料,用石油醚浸提,石油醚浸提结束后过滤,回收滤渣,然后用乙醇室温浸提,乙醇浸提结束后,过滤、浓缩,得乙醇总浸膏;将乙醇总浸膏分散于少量水中形成分散液,依次用溶剂石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,回收溶剂,得到石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位;
2)将步骤1)所得正丁醇部位采用硅胶柱色谱分离,用二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱,以硅胶薄层色谱检测合并,得到8个组分,按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1 8;
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3)将步骤2)所得组分4,经硅胶柱色谱分离,以二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱,经硅胶薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂,得到3个亚组分,按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr.4.1、Fr.4.2、Fr.4.3;Fr.4.3先经硅胶柱色谱分离,然后用Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化,薄层色谱检测、合并相同组分并减压浓缩回收溶剂、干燥,得到化合物1;
4)将步骤2)所得组分7,经硅胶柱色谱分离,以二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱,经硅胶薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂,得到4个亚组分,按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr.7.1、Fr.7.2、Fr.7.3、Fr.7.4;Fr.7.2经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化,薄层色谱检测、合并相同组分并减压浓缩回收溶剂、干燥,得到化合物2;
化合物1和/或2即为促凝血桃花有效成分;
化合物1、2的结构如下所示:
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步骤2)中,硅胶柱色谱分离时,用体积比100:0、100:1、100:2、100:4、100:8、100:16、
100:32、0:100的二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱;
步骤3)中,硅胶柱色谱分离时,用体积比20:1 2:1的二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱;
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Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化时,以甲醇为洗脱液;
步骤4)中,硅胶柱色谱分离时,用体积比15:1 1:1的二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱;
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Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化时,以体积比1:1的二氯甲烷‑甲醇为洗脱液。
2.根据权利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分离方法,其特征在于,步骤1)中,干燥、粉粹后的桃花在室温下用石油醚浸提2 4次,每次3 4 d。
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3.根据权利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分离方法,其特征在于,步骤1)中,用体积浓度70 80%的乙醇在室温下浸提滤渣,浸提2 4次,每次3 4 d,乙醇浸提结束后合并~ ~ ~乙醇浸提液,过滤、浓缩,得乙醇总浸膏。