1.一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于检测操作步骤如下:(1)制备供试品溶液
取供试材料,冷冻干燥或真空干燥至恒重,粉碎,精密称定,置于具塞锥形瓶中,精密加入正丁醇,超声提取,离心分离,残渣继续重复提取2次,合并上清液;减压浓缩除去正丁醇,得到浸膏,将浸膏加入浓度10%的甲醇溶液中溶解,经C18 SPE柱纯化富集,甲醇‑水系统梯度洗脱,收集浓度45%的甲醇溶液洗脱部分,冻干,加入适量甲醇溶液制成供试品溶液;
所述供试材料为新鲜蕨菜或干蕨菜;
(2)高效液相色谱法检测
将供试品溶液采用高效液相色谱法进行检测,测得供试品溶液中原蕨苷的峰面积值;
(3)构建原蕨苷标准曲线方程
‑1
精密称取标准品原蕨苷,置于容量瓶中,加甲醇溶液配成5‑300μg·mL 的五个以上的对照品溶液,采取步骤(2)的高效液相色谱法检测条件,测定五个以上的对照品溶液的峰面积,获得原蕨苷标准曲线方程;
(4)测定原蕨苷含量
将测得的供试品溶液的峰面积值,代入步骤(3)构建的原蕨苷标准曲线方程,计算出供试品溶液中原蕨苷的浓度,进而计算出供试品中原蕨苷的含量。
2.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,所述冷冻干燥法的干燥温度为‑50℃以下。
3.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,所述真空干燥法干燥的干燥温度为40‑60℃。
4.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,所述提取剂正丁醇与蕨菜冻干粉的料液比为1g:10‑30mL。
5.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,超声波提取条件:提取功率200w~300w、频率为3.0kHz~5.0kHz、超声提取20‑40min。
6.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,所述C18SPE柱纯化富集为将原蕨苷正丁醇提取物溶于浓度10%的甲醇溶液,上样,采用体积浓度10%的甲醇溶液、体积浓度20%的甲醇溶液和体积浓度45%的甲醇溶液依次梯度洗脱;收集体积浓度45%的甲醇溶液洗脱部分,‑105℃冻干,溶于甲醇制成供试品溶液。
7.根据权利要求1所述的一种蕨菜中原蕨苷含量的检测方法,其特征在于:步骤(2)中,高效液相色谱法的检测条件:C18反向色谱柱(250×4.6mm,5μm);流动相:流动相A为水,流动‑1
相B为甲醇,检测波长214nm;柱温30℃;流速:1.0mL·min ;进样量10μL;梯度洗脱;0‑5min,
20‑40%B;5‑10min,40‑45%B;10‑20min,45‑50%B;20‑25min,50‑57%B;25‑27min,57‑
100%B;27‑35min,100%B。