欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13336804447 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13336804447
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2020112098398
申请人: 红河学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-04-26
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种紫杉醇-抗菌肽偶合物,其特征在于,所述紫杉醇-抗菌肽偶合物为PTX-LL-24,分子式为:C47H51NO14-LL-24,分子结构式为:

2.一种如权利要求1所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述紫紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法应用生物信息学技术,对LL-37的α-螺旋区、β-折叠区、跨膜结构、信号肽、电荷、疏水区和亲水区氨基酸进行分析,将其改造为由24个氨基酸组成的抗菌肽,命名为LL-24,一级结构为:NH2-LVRKWLRIRQIWFIYFWFLRIQWL-COOH,将PTX与LL-24偶联,获得PTX-LL-24复合物。

3.如权利要求2所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述紫紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法包括以下步骤:第一步,对LL37抗菌肽的二级结构、跨膜区疏水性、C端两亲性、电荷偏倚、螺旋长度、膜蛋白拓扑学等进行分析通过改变抗菌肽螺旋区、折叠区、跨膜结构、信号肽、电荷、疏水区和亲水区氨基酸,获得经分子改造后的新型抗菌肽LL-24;

第二步,以马来酰亚胺基丙酸Mal作为桥梁,紫杉醇PTX结构中C2′位OH与Mal脱水缩合形成PTX-Mal复合物;

第三步,在LL24氨基端添加一个半胱氨酸Cys,使Cys中的巯基SH与PTX-Mal中Mal上双键发生加成反应,最终形成PTX-Mal-C-LL-24偶合物。

4.如权利要求3所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述LL-24抗菌肽的合成方法包括:(1)称量氯代邻氯苯基二苯基甲烷2-CL树脂0.5g,放入反应器中,用二氯甲烷DCM浸泡

10min后用N,N二甲基甲酰胺DMF洗涤2次,再用DCM洗涤一次,备用;

(2)称量第一个Aa,0.5g*0.3mmol/g*1.33=0.20mmol用DCM溶解,加入0.25ml N,N二异丙基乙胺DIEA摇匀后加入装有树脂的反应器中,摇晃或氮气鼓泡反应90min,反应过程中DCM挥发,需要补加DCM;

(3)反应结束后,补加分析级甲醇1ml2ml DCM,封闭反应20min后,DMF洗涤树脂三次;

(4)脱FMOC,20%哌啶+80%DMF,脱保护20min后用DMF洗涤5次,每次30s,取少量树脂

100℃茚三酮检测显色;

(5)称量下一个氨基酸fmocValoh0.15mmol*3=0.45mmol0.45mmolHOBT,用DMF溶解加入0.25mlDIC,活化1min加入反应器中反应1h反应结束后取少量树脂检测无色即可,若有颜色需要重复投料6重复步骤(3)和(4),直到肽链合成结束用甲醇洗涤三次抽干称重,加入切割液比例1g树脂10ml切割液室温裂解2h,后过滤得到裂解液,加入乙醚1ml裂解液:8ml乙醚摇匀离心得到粗品肽HPLC纯化得到纯度90%LL-24精品肽备用。

5.如权利要求4所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述切割液为

95%TFA2%三异丙基硅烷、2%1,2乙二硫醇、1%纯水。

6.如权利要求3所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述PTXLL24的合成包括:(1)称取100mg紫杉醇和4mgDAMP,用10mlDCM溶解,加入圆底烧瓶中冰浴搅拌,再称取

40mg马来酰亚胺丙酸用5mlDCM溶解,加入30mgDIC然后滴入到烧瓶中,反应过夜,反应结束后25旋蒸去除DCM得到粗品,纯化制备约得到35mgPTXMal的精品;

(2)称取50mgLL24,用乙腈水溶解,放入烧瓶中搅拌,同样用乙腈水溶解PTXMal滴加到烧瓶中,用碳酸氨溶液调节pH值,搅拌反应纯化制备得到PTXLL24。

7.如权利要求6所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述同样用乙腈水溶解30mgPTXMal滴加到烧瓶中,用碳酸氨溶液调节pH值到7.5,搅拌反应30min。

8.如权利要求2所述的紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法,其特征在于,所述紫杉醇-抗菌肽偶合物的合成方法的合成路线为:

9.一种抑制宫颈癌细胞活性的化合物,其特征在于,所述抑制宫颈癌细胞活性的化合物为紫杉醇-抗菌肽偶合物。

10.一种抑制胰腺癌细胞活性的化合物,其特征在于,所述抑制胰腺癌细胞活性的化合物为紫杉醇-抗菌肽偶合物。